[发明专利]青稞膳食纤维-多酚复合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于食品加工领域，具体涉及青稞膳食纤维-多酚复合物的制备方法。

背景技术

全谷物食品可有效预防代谢综合症，预防和降低心血管疾病、Ⅱ型糖尿病、肥胖和某些癌症的发病率。谷物食品作为世界上主要的食物来源，提供了50％人体摄入的膳食纤维。研究发现，摄入膳食纤维能够调节人体饥饿状态、血糖生成指数、脂肪代谢和炎症，起到益生元作用，可有效预防慢性心脏病和消化系统疾病。许多研究者对于谷物中的多糖组分进行了研究，但是至今未阐明其有益健康的生化机制。因谷物多糖组分包含了大量的多酚化合物，95％的谷物多酚和细胞壁多糖紧密结合，研究者提出了“膳食纤维抗氧化剂(dietary fibre-antioxidants)”和“膳食纤维-多酚复合物(dietary fibre-phenolic compounds，DF-PC)”的概念，认为谷物膳食纤维是体内传送多酚化合物的天然功能成分。谷物中膳食纤维包括可溶性膳食纤维(soluble dietary fibre，SDF)和不可溶膳食纤维(insoluble dietary fibre，IDF)，二者在谷物中的例与谷物种类关系很大；谷物中的酚酸主要是羟基肉桂酸，其中阿魏酸含量最为丰富，被视为谷物抗氧化活性最主要的多酚化合物。膳食纤维和多酚化合物通过酯键共价结合在一起，形成DF-PC复合物。一般认为，谷物中SDF/IDF比例越高，DF-PC复合物抗氧化效果越好。

青稞作为云南省迪庆藏族自治州的传统种植作物，含有丰富的膳食纤维、多酚化合物和微量元素等功能成分，具有较好的开发价值。但是目前青稞深加工程度不深，限制了农民增收，制约了青稞产业的发展。本技术通过研究青稞DF-PC复合物的制备方法，并通过研究其中多酚化合物、类黄酮含量以及其抗氧化活性，为阐明膳食纤维和多酚相互作用对多酚生物利用度的作用机制，提高多酚化合物的生物有效性和生物利用度，持续发挥抗氧化作用，预防疾病，维持机体健康提供科学依据，同时为青稞开发利用提供思路，促进云南省青稞产业的发展。

发明内容

本发明的目的在于提供青稞膳食纤维-多酚复合物制备方法，本法采用酶重量法，制备纯度高、性能好、成本低的青稞膳食纤维-多酚复合物制备方法。

本发明通过以下技术方案实现：

青稞膳食纤维-多酚复合物的制备方法，包括以下步骤：

1)将青稞除杂后粉碎，过50目筛，筛下青稞面粉备用；

2)称取筛下青稞面粉，用pH6.25、浓度0.05mol/L的MES-TRIS缓冲溶液溶解青稞面粉，磁力搅拌直至样品完全分散在缓冲溶液中；

3)避光加入耐高温α-淀粉酶(按165U/g青稞粉添加耐高温α-淀粉酶)溶液，置于95℃恒温振荡水浴锅中持续搅拌，当溶液的温度升高至95℃开始计时，反应30min；

4)反应完成后，待溶液冷却至45℃，调节溶液pH：用NaOH溶液调节pH至10.5，在溶液中加入碱性蛋白酶(按750U/g青稞粉添加碱性蛋白酶)溶液，置于45℃的恒温振荡水浴锅中，当溶液温度达45℃时开始计时，持续搅拌，反应30min；

5)反应结束后，调节溶液pH：用HCl溶液调节pH至4.25，往溶液中边搅拌边加入糖化酶(按600U/g青稞粉添加糖化酶)，持续搅拌，当温度达61℃时开始计时，反应30min；

6)将酶解液趁热于4000r/min离心15min，沉淀为IDF-PC，收集后于-18℃下冻结，真空冷冻干燥4d，装入自封袋中，-18℃避光储存；

7)上清液中加入4倍体积的60℃95％乙醇溶液，静置，自然冷却至室温，于0-4℃冰箱中沉淀12小时以上；

8)沉淀后轻轻倒出上清，取下层浑浊部分于4000r/min离心15min，所得沉淀为SDF-PC，收集后于-18℃下冻结，真空冷冻干燥4d，装入自封袋中，-18℃避光储存。

本发明制备方法步骤(3)耐高温α-淀粉酶酶解时，加入的耐高温α-淀粉酶通过现用现称取耐高温α-淀粉酶，用pH＝6.25、浓度0.05mol/L的MES-TRIS缓冲溶液溶解制得。

本发明制备方法步骤(4)冷却时，直接将烧杯放入低温水中进行冷却。

本发明制备方法步骤(5)碱性蛋白酶酶解时，加入的碱性蛋白酶溶液通过现用现称取的碱性蛋白酶用pH＝10.5、浓度0.05mol/L的MES-TRIS缓冲溶液溶解制得。

本发明制备方法步骤(8)保证乙醇溶液温度为60℃，当温度达不到时，沉淀不完全，且上清液较浑浊，待温度冷却至室温再放入冰箱。