[发明专利]高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种采用内标法作为定量分析方法的高效液相色谱法测定焦性没食子酸的新方法，属于化学分析方法技术领域。

背景技术

焦性没食子酸，是我国重要林特产五倍子的精深加工产品，广泛用于合成医药、农药、染料中间体、感光材料、电子化学品制造业，也是重要的化学试剂，在重要分析中测定铋、锑、银、汞等，在气体分析中用于吸收氧气，还是强酸条件下测定废水COD的最佳试剂。中国是焦性没食子酸的主要生产国，产品主要销往日本、美国和欧洲。

日本焦性没食子酸产品工业标准中对焦性没食子酸的测定采用气相色谱法，但由于该方法需要先对焦性没食子酸进行衍生化反应，使得操作过程复杂，且焦性没食子酸在高温条件下容易发生分解，给检测结果的准确性带来了一定的影响。

发明专利《高效液相色谱法测定焦性没食子酸》(专利号CN 102759584A)中所报道的高效液相色谱法测定焦性没食子酸方法，定量方法采用焦性没食子酸的主要原料没食子酸作为内标物质，但由于生产工艺原因，焦性没食子酸在生产过程中不可避免的含有少量的没食子酸，使得这种方法测得的焦性没食子酸含量偏高。焦性没食子酸的测定值往往会超过100％，使得这种方法不具有实际应用性。采用高效液相色谱测定焦性没食子酸时，定量方法也有采用面积归一化法的，但由于在检测条件下，焦性没食子酸与没食子酸、单宁酸等杂质的灵敏度不一样，所以检测的结果不确定性大导致结果不准确。

发明内容

本发明的目的是提供一种能克服现有焦性没食子酸检测技术中检测结果不确定度大，准确度低等方面的不足，即提供一种高效液相色谱内标定量检测技术，该方法简单、结果准确可靠。

本发明的技术方案是：一种高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸的方法，以鞣花酸作为内标物质，用液相色谱仪在一定的色谱操作条件下，采用内标法对焦性没食子酸进行定量检测；具体包括配制焦性没食子酸标准溶液，鞣花酸标样，待测试样溶液，然后测定试样中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值，标样溶液中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值。

所述的液相色谱仪为Shimadzu AB20，LCsolution色谱工作站和紫外检测器；Hypersil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；色谱分析条件的流动相为：甲醇：含0.1％wt三氟乙酸的水溶液，采用梯度洗脱；流速1.0mL/min；检测波长266nm；柱温：室温；进样量：20μL；焦性没食子酸保留时间约4.33min；鞣花酸保留时间约19.25min。

所述的焦性没食子酸标准溶液浓度为2.0mg/mL；鞣花酸内标溶液浓度为0.4mg/mL；焦性没食子酸试样溶液浓度为1.0mg/mL。

所述的内标法对焦性没食子酸进行定量检测的方法具体为：先绘制标准曲线，精密吸取焦性没食子酸标样溶液适量，加内标鞣花酸溶液稀释成：焦性没食子酸浓度为2000，1000，500，250，125，62.5μg/mL，内标鞣花酸浓度为400μg/mL的标样混合溶液，分别进样20μL，测定峰面积，以焦性没食子酸与内标峰面积的比值作为纵坐标，以焦性没食子酸质量分数μg/mL为横坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程1：

X/%=m1×r2×Pm2×r1---(1)]]>

式中：m₁—焦性没食子酸的质量，g；r₂—试样中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值；P—焦性没食子酸的质量分数，％；m₂—焦性没食子酸试样的质量，g；r₁—标样溶液中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值；