[发明专利]高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸含量的方法

权利要求书

1.一种高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸的方法，其特征在于：以鞣花酸作为内标物质，用液相色谱仪在一定的色谱操作条件下，采用内标法对焦性没食子酸进行定量检测；具体包括配制焦性没食子酸标准溶液，鞣花酸标样，待测试样溶液，然后测定试样中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值，标样溶液中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸的方法，其特征在于：所述的液相色谱仪为Shimadzu AB20，LCsolution色谱工作站和紫外检测器；Hypersil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；色谱分析条件的流动相为：甲醇：含0.1％wt三氟乙酸的水溶液，采用梯度洗脱；流速1.0mL/min；检测波长266nm；柱温：室温；进样量：20μL；焦性没食子酸保留时间约4.33min；鞣花酸保留时间约19.25min。

3.根据权利要求1所述的高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸的方法，其特征在于：所述的焦性没食子酸标准溶液浓度为2.0mg/mL；鞣花酸内标溶液浓度为0.4mg/mL；焦性没食子酸试样溶液浓度为1.0mg/mL。

4.根据权利要求1所述的高效液相色谱-内标法测定焦性没食子酸的方法，其特征在于：所述的内标法对焦性没食子酸进行定量检测的方法具体为：先绘制标准曲线，精密吸取焦性没食子酸标样溶液适量，加内标鞣花酸溶液稀释成：焦性没食子酸浓度为2000，1000，500，250，125，62.5μg/mL，内标鞣花酸浓度为400μg/mL的标样混合溶液，分别进样20μL，测定峰面积，以焦性没食子酸与内标峰面积的比值作为纵坐标，以焦性没食子酸质量分数μg/mL为横坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程1：

X/%=m1×r2×Pm2×r1---(1)]]>

式中：m₁—焦性没食子酸的质量，g；r₂—试样中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值；P—焦性没食子酸的质量分数，％；m₂—焦性没食子酸试样的质量，g；r₁—标样溶液中焦性没食子酸与内标物峰面积之比的平均值；

按上述色谱条件分别进行试样测定，记录峰面积，以内标法标样与内标峰面积比值进行回归计算出样品中的焦性没食子酸质量百分含量X。