[发明专利]单纯疱疹病毒1型实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒

权利要求书

1.一种单纯疱疹病毒1型实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒，包含有一条序列表中序列1所示的HSV-1的靶标核酸的捕获探针，一对用于靶标核酸扩增的检测引物T7和nT7，和一条用于所述靶标核酸扩增产生的RNA拷贝特异结合的HSV-1检测探针；还包含有HSV-1内标和内标检测探针；

所述捕获探针的核苷酸序列如序列表中序列2所示；所述HSV-1检测引物由T7引物和nT7引物组成，T7引物序列如序列表中序列3所示，nT7引物序列如序列表中序列4所示；所述HSV-1检测探针的核苷酸序列如序列表中序列5所示，5’端标记FAM荧光基团，3’端标记DABCYL淬灭基团；

所述HSV-1内标为单纯疱疹病毒1型核苷酸序列的竞争性内标，可与捕获探针特异性结合，并使用T7和nT7引物，由序列表中序列6所示的体外转录RNA；所述内标检测探针的核苷酸序列如序列表中序列7所示，5’端标记HEX荧光基团，3’端标记DABCYL淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含有M-MLV反转录酶和T7RNA聚合酶，所述M-MLV反转录酶和T7RNA聚合酶存在于一SAT酶液中，所述捕获探针存在于病毒核酸提取液中，所述T7引物、nT7引物和检测探针存在于扩增检测液中。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述内标检测探针存在于扩增检测液中。

4.根据权利要求1至3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含裂解液、病毒核酸提取液、洗涤液、HSV-1扩增检测液、SAT酶液、HSV-1阳性对照、HSV-1阴性对照、HSV-1内标，其中：

裂解液：含硫酸铵(NH₄)₂SO₄和HEPES；

病毒核酸提取液：含捕获探针和磁珠；

洗涤液：含NaCl和SDS；

HSV-1扩增检测液：含dNTP、NTP、T7引物、nT7引物、HSV-1检测探针和内标检测探针；

SAT酶液：含M-MLV反转录酶、T7RNA聚合酶；

HSV-1阳性对照；含单纯疱疹病毒1型US5基因核酸的稀释物或单纯疱疹病毒1型的体外转录RNA稀释物，所述单纯疱疹病毒1型的体外转录RNA序列为序列8所示；

HSV-1阴性对照：不含有单纯疱疹病毒1型靶标核酸序列或不含有单纯疱疹病毒1型的溶液；

HSV-1内标：HSV-1ICRNA的稀释物。