[发明专利]Bcl-2抑制剂ABT-199的合成

说明书

(一)技术领域

本发明属于药物合成技术领域，具体地，本发明涉及Bcl-2抑制剂ABT-199的合成方法。

(二)技术背景

B淋巴细胞瘤-2基因简称bcl-2(B-cell lymphoma-2)，是细胞凋亡研究中最受重视的癌基因之一。Bcl-2基因(即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)是一种原癌基因，它具有抑制凋亡的作用，并且近年来的一些研究已开始揭示这一作用的机制。目前已经发现的Bcl-2蛋白家族按功能可分为两类，一类是像Bcl-2一样具有抑制凋亡作用，如哺乳动物的Bcl-XL、Bcl-W、Mcl-1、A1、线虫Ced-9、牛痘病毒E1B119kD等，而另一类具有促进凋亡作用，如Bax、Bcl-Xs、Bax、Bak、Bik/Nbk、Bid和Harakiri。在动物王国中，大部分细胞死亡都是通过细胞凋亡实现的。在脊椎动物中，凋亡途径主要有两条，死亡受体途径和线粒体途径。在线粒体途径中，Bcl-2家族的蛋白相互作用，从而调节和影响着线粒体外膜通透性(Mitochondrial outer membrane permeabilization，MOMP)。由于膜的通透性，线粒体内膜间隙中的蛋白质得以进入到细胞质，激活半胱天冬酶，从而使细胞产生明显的凋亡特征。MOMP是线粒体凋亡途径的关键决定因素，不同类别的Bcl-2蛋白对MOMP的控制也是这一过程的核心。

Bcl-2家族包括三种类型的蛋白：一是具有促凋亡效应的蛋白，包括BAX和BAK，它们能够影响MOMP；二是具有抗凋亡效应的蛋白，包括Bcl-2，Bcl-XL，Bcl-W，Mcl-1和A1，它们能够阻碍MOMP；三是只含BH3结构的蛋白(例如：BID，BIM，BMF，PUMA，BAD和NOXA)，又名BH3-only蛋白。它们调节着其它两个类别的蛋白。最近研究表明，BH3-only蛋白主要以启动线粒体途径为主，当细胞受到一些信号刺激时，BH3-only蛋白活化，并通过一定的方式活化Bax或Bak，使Bax和Bak在线粒体膜上形成寡聚物，从而使膜通透性增加，最终释放促凋亡蛋白如细胞色素C，驱使caspase活化并介导细胞凋亡。越来越多的研究表明，BH3-only蛋白参与了关键的生物学过程，其缺乏可引起自身免疫病和肿瘤。

ABT-199是AbbVie研发的Bcl-2抑制剂，I期试验(NCT01328626)入组了84例复发型/难治型CLL/SLL患者和44例复发型/难治型非霍奇金淋巴瘤患者。ABT-199治疗CLL/SLL的应答率为79％(完全应答率为22％)，中位持续应答时间为20.5个月；ABT-199治疗非霍奇金淋巴瘤的应答率为48％(完全应答率为7.5％)。ABT-199的疗效能够与obinutuzumab、idelalisib、ibrutinib匹敌，有望成为第一个上市的Bcl-2抑制剂，目前ABT-199正在进行III期临床研究。

ABT-199的化合物CAS号为1257044-40-8，化合物结构如下：

专利WO2012058392、WO2012071336、WO2010138588等公开了ABT-199的制备方法，以5-溴-1H-吡咯[2，3-b]吡啶为原料经保护羟基化、取代后得到化合物5，在与化合物6反应、水解得到化合物9，化合物9与化合物10缩合得到ABT-199，具体路线如下：

该方法在制备化合物5时，由于化合物4有两个F，都可以参与反应，导致生成化合物5的产率很低，且无法纯化，往下反应生成2位取代和4位取代的混合物；在反应过程中脱除TIPS保护基，导致底物中-OH与自身另外一分子N反应，导致产率很低。因此，该路线存在种种弊端。

(三)发明内容

本发明提供了一种新的合成方法，能够克服前人路线中的缺点，产率高，操作简便，合成成本低。

为了达到上述要求，本发明使用2-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(A)为原料，与5-羟基-7-氮杂吲哚(B)取代，还原，生成化合物(D)，化合物(D)经环合后与化合物(H)取代，水解，生成化合物(J)，再与化合物(K)反应得到ABT-199。

具体路线如下：

有益效果：

(1)发明原料价廉，步骤简单；

(2)避免了WO2012058392中多取代产率低，不好纯化的缺点。

(3)化合物A与未经TIPS的化合物(B)反应，通过控制反应条件，降低自身取代的几率，从而增加反应的收率。

(四)具体实施方式