[发明专利]一种鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物及应用与方法

权利要求书

1.一种鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物，其特征在于所述的鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物的DNA序列为：

SPS-F2：5' GGTGGTTTTCGTTGGAGAAA 3'

SPS-R2：5' CATTAGGGCTGTCGAATGGT 3'。

2.一种权利要求1所述的鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物的应用，其特征在于所述的鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物在鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量中的应用。

3.一种权利要求1所述的鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的方法，其特征在于包括前处理和实时荧光定量PCR反应骤，具体包括：

A、前处理：提取待测烤烟样品的基因组总RNA，反转录得到第一链cDNA；

B、PCR反应：以cDNA作为模板，进行实时荧光定量PCR扩增。

4.根据权利要求3所述的所述的鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的方法，其特征在于B步骤中所述的PCR扩增的反应体系为：2×SYBR Premix 12.5μl，Forward Primer 0.4μM， Reverse Primer 0.4μM，Rox 1μM，加ddH₂O补充至25 μl。

5.根据权利要求3所述的所述的鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的引物鉴定烤烟蔗糖磷酸合成酶基因表达量的方法，其特征在于B步骤中所述的PCR扩增的反应条件为：95℃ 30 sec 1个循环；95℃ 5 sec,58 ℃ 30 sec 45个循环；95℃ 30 sec，58 ℃ 1 min，95℃ 1 min  1个循环。