[发明专利]富血小板血浆的提取方法和提取的富血小板血浆有效
申请号: | 201410570704.2 | 申请日: | 2012-07-30 |
公开(公告)号: | CN104383726A | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
发明(设计)人: | 林卓衡 | 申请(专利权)人: | 博雅干细胞科技有限公司 |
主分类号: | B01D21/26 | 分类号: | B01D21/26;A61K35/16 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214092 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血小板 血浆 提取 方法 | ||
1.从血液中提取富血小板血浆的方法,其包括以下步骤:
(a)使采集的全血置于含有抗凝剂的容器中,使血液和抗凝剂充分混匀;
(b)使混有抗凝剂的血液置于离心管中,进行第一次离心,使血液基本上分成三层;
(c)将最上层和大部分的中间层抽出并转移到新的离心管中,混合均匀,进行第二次离心;
(d)弃掉离心管上层的血浆,利用剩余的血浆使沉淀的血小板重新悬浮,即得富血小板血浆(Platelet Rich Plasma:PRP)。
2.根据权利要求1的方法,其中步骤(a)中:
所述全血是新鲜的全血;和/或
所述全血是受试个体例如患者的全血。
3.根据权利要求1至2任一项的方法,其中步骤(b)中:
所述抗凝剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸钙钠、枸橼酸葡萄糖、或其组合;
所述抗凝剂与全血的重量比为1:8~10;和/或
所述步骤(a)中还包括在使血液和抗凝剂后取适量用于测定其中血液中血小板的数量的步骤。
4.根据权利要求1至3任一项的方法,其中步骤(b)中:
经第一次离心后是达到使血液基本上分成三层的程度;和/或
经第一次离心后是达到使血液基本上分成三层的程度,其中最上层是含血小板的血浆层,中间一层是血块黄层,最底层的是红细胞层。
5.根据权利要求1至4任一项的方法,其中步骤(b)中:
离心的转速为2000rpm~3000rpm;
离心的时间为1-10min;和/或
离心的转速为2300rpm~2500rpm,时间为3-5min。
6.根据权利要求1至5任一项的方法,其中步骤(c)中:
离心的转速为1000rpm~2000rpm;
离心的时间为10-30min;
离心的转速为1400rpm~1600rpm,时间为18-22min;和/或
离心的转速为1500rpm,时间为20min。
7.根据权利要求1至6任一项的方法,其中步骤(c)中:
所得上层和大部分中间层经混匀后,其中血小板的浓度是分离前全血中血小板浓度的1-5倍;和/或
还包括在使抽取的最上层和中间层混合均匀后,取适量用于测定其中的血小板的数量的步骤。
8.根据权利要求1至7任一项的方法,其中步骤(d)中:
所述弃掉离心管上层的血浆是指弃掉离心管上层至少2/4的血浆;
所述弃掉离心管上层的血浆是指弃掉离心管上层至少3/4的血浆;
弃掉离心管上层的血浆后,利用下部剩下的血浆重新使沉淀下来的血小板悬浮,获取所述富血小板血浆;
步骤(d)所得富血小板血浆中血小板的浓度是分离前全血中血小板浓度的5-10倍;和/或
步骤(d)中还包括在获得富血小板血浆(PRP)后,取适量用于测定其中的血小板的数量的步骤。
9.一种富血小板血浆,其中包含0.5~3×109/ml浓度的血小板。
10.根据权利要求9的富血小板血浆,其基本上是由权利要求1-8任一项所述方法获得的。
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