[发明专利]稻瘟病菌无毒基因AvrPib特异性分子标记及其方法与应用有效
| 申请号： | 201410570496.6 | 申请日： | 2014-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN104328114A | 公开（公告）日： | 2015-02-04 |
| 发明（设计）人： | 潘庆华;张树林;何丽云;杨先锋;王玲 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 稻瘟病 无毒 基因 avrpib 特异性 分子 标记 及其 方法 应用 | ||
1.稻瘟病菌无毒基因AvrPib的分子标记，其特征在于，所述分子标记由引物对AvrPibF1/R1和AvrPibF2/R2组成，所述引物对的序列如SEQ ID NO：1～4所示。
2.权利要求1所述分子标记在稻瘟病菌群体监测中的应用。
3.应用权利要求1所述分子标记鉴定稻瘟病菌基因型的方法，其特征在于，通过常规PCR技术，利用所述引物对分别对待测稻瘟病菌株进行基于PCR扩增产物的基因型分型。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，测试菌株的最终基因型由权利要求1所述的2对分子标记PCR基因型分析整合获得。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR的扩增体系为20 μl，包括2 μl 10×PCR Buffer、1.6 μl 2.5 mM的dNTPs、0.1 μl 5 U/μl的rTaq酶、1 μl 90 ng/μl的DNA模板、10 μM引物各1μl，余量为双蒸水。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，当利用引物对AvrPibF1/R1进行扩增时，PCR扩增条件为：预变性94℃ 3 min，变性94℃ 30 sec，退火62℃ 30 sec，延伸72℃ 3 min 20 sec，扩增35个循环，最后72℃延伸5 min。
7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，当利用引物对AvrPibF2/R2进行扩增时，PCR扩增条件为：预变性94℃ 3 min，变性94℃ 30 sec，退火60℃ 30 sec，延伸72℃ 2 min 20 sec，扩增35个循环，最后72℃延伸5 min。
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