[发明专利]葡萄发酵提取物通过美拉德反应生产烟用香料的方法

说明书

技术领域

本发明涉及烟用香料的制备方法，具体地指一种葡萄发酵提取物通过美拉德反应生产烟用香料的方法。

背景技术

天然香料不断增长的市场需求，促进了香精香料生产技术的迅速发展。尽管传统的化学合成和天然提取方法还在起重要的作用，但是利用生物化学技术生产香料正受到人们越来越多的重视。目前，在香精香料的生物合成中应用最广泛的生物技术是微生物发酵工程，以天然植物及其提取物为原料，利用微生物可以生产各种天然香料。

微生物技术制备香精香料具有如下优点：生物性香料组分丰富，香气具有独特风格而又与烟香协调，能够显著提高香气质量，使烟气醇和、细腻、饱满；便于构建自主知识产权，“天然”、“绿色”，类似于自然界中的生物合成过程，难以模仿；香料风格可以定向调控，可以根据不同品牌卷烟加香要求，开发出适合于某种品牌卷烟的专用香料；有助于形成卷烟产品的独特风格，在卷烟新产品开发加香工艺中可以发挥较大作用；并且成本较为低廉、容易转化到生产中。

美拉德反应类香料一直是烟草和食品上极为重要和极有应用价值的香料，美拉德反应物在烟用香料中应用广泛。烟草在调制、陈化、加工和燃吸等过程中，均可能发生美拉德反应。随着人们健康意识的提高，烟厂在解决降低卷烟焦油量、而又能保持或满足卷烟吸食可用性方面所面临的困难日益突出。美拉德反应作为烟草特征香气形成的重要途径之一，在烟草增香中的应用研究倍受青睐。反应产生的香气根据糖源、氮源不同也不同，反应产生大量杂环香味化合物，对卷烟烟气有改善作用。

公开号为CN101411543的中国专利申请，公开了一种制备烟用香料的方法，其将糖类物质与氨基酸进行反应，制得烟用香料。然而，该方法仅用反应的基本物质—糖类与氨基酸间的美拉德反应产物作为烟用香料，难于制备特种香型香料。

公开号为CN101637305A的中国专利申请，公开了一种利用美拉德反应制备烟用香料的方法，其将葡萄糖、复配氨基酸及特种定向增香型烟末浸膏进行反应，值得具有巧克力和烤香的烟用香料。然而，该方法原料来源复杂，成本较高，制得香料香型较单一，难于普遍应用于卷烟中。

综上所述，利用美拉德反应制备烟用香料的方法，要么工艺复杂，成本高，原料来源不稳定，要么香气单调，效果不理想，因此，提供一种效果好，成本低，烟用香味丰满细腻的美拉德反应烟用香料是非常必要的。

发明内容

本发明的目的就是要克服现有技术所存在的不足，提供一种葡萄发酵提取物通过美拉德反应生产烟用香料的方法，从而形成香味丰富、独特，品种多样、具有浓郁果香，与卷烟烟气协调的香料。

为实现上述目的，本发明所提供的葡萄发酵提取物通过美拉德反应生产烟用香料的方法，包括以下步骤：

1)先将葡萄洗净，果渣灭菌后加入实验室微生物产香菌株混合均匀，于30℃恒温发酵3天后，分三次加入体积分数75％乙醇，每次加热回流提取3小时，过滤，合并3次滤液，静置，取上清液于60℃蒸馏除去乙醇，所得香料再用体积分数95％乙醇进行回溶，静置，取上清液减压浓缩至膏状，制得葡萄发酵提取物；

2)在葡萄发酵提取物中加入氮源物质，所述氮源物质为脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、磷酸氢二胺中一种或几种，加入溶剂，在常压下搅拌、加热回流使其发生美拉德反应，调节反应体系的PH值、回流温度以及反应时间，即得烟用香料。

本发明在步骤1)中，实验室微生物产香菌株的制备方法：将成熟的西红柿去皮、破碎，取汁液加入无菌水中，然后接种于含氯霉素的马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上，于28℃恒温培养48h；从平板中挑取单菌落，将所得到菌株单菌落在马铃薯葡萄糖琼脂培养液中28℃厌氧选择富集培养48h；将试样分别稀释于102、104、106倍，涂布于分离纯化的马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上，于28℃恒温培养48h；用接种环挑取纯化平板上的单菌落，在马铃薯葡萄糖琼脂培养液中培养富集；取富集液接种于葡萄汁培养基中，于28℃恒温培养7d，取出后通过嗅香进行筛选，筛出一株具有特色香气的产香菌株。

本发明在步骤2)中，加入所述氮源物质时，各原料重量份比及反应条件为：

在葡萄发酵提取物中加入脯氨酸时，葡萄发酵提取物500份，脯氨酸2～20份，溶剂10～25份，反应体系的PH值为9～11，回流温度为80～115℃，反应时间为1～4小时；

在葡萄发酵提取物中加入丙氨酸时，葡萄发酵提取物500份，丙氨酸5～18份，溶剂10～40份，反应体系的PH值为6～9，回流温度为60～95℃，反应时间为2～6小时；