[发明专利]检测草甘磷的时间分辨荧光免疫试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种检测草甘磷的时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征在于：由多孔包被板，缓冲液，草甘磷标准品，草甘磷的抗体冻干品，铕标记的羊抗鼠抗体，洗涤液和增强液所组成。

2.一种根据权利要求1所述检测草甘磷的时间分辨荧光免疫分析试剂盒的检测方法，包括免疫原、包被原和单克隆抗体的制备以及样品前处理，其特征在于：

(1)将草甘磷与牛血清白蛋白偶联，得到免疫原；

(2)将草甘磷与卵血清蛋白偶联，得到包被原；

(3)用步骤(1)的免疫原免疫小鼠，通过杂交瘤技术，得到分泌抗草甘磷的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；

(4)以体内诱生腹水法大量制备抗体，使用ProteinG柱进行纯化，获得抗草甘磷的单克隆抗体

(5)用步骤(2)的包被原包被固相载体；

(6)将动物组织先经过酸解提取后，再过MAX柱净化，最后加入衍生试剂和催化剂进行处理，得到待测产物；

(7)将步骤(6)的待检物进行测量荧光强度cps，对照标准曲线计算样品中的草甘磷草甘磷含量。

3.根据权利要求1所述检测草甘磷草甘磷的时间荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的固相载体是多孔包被板，采用96孔的多微孔包被板作为固相载体。

4.根据权利要求1所述检测草甘磷草甘磷的时间荧光分辨免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的衍生试剂是丁胺。

5.根据权利要求1所述检测草甘磷草甘磷的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的催化剂是腈基磷酸二乙酯。

6.根据权利要求1所述检测草甘磷草甘磷的时间荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述步骤(6)和(7)具体为取包被有草甘磷-OVA的微孔包被板，加入50μL处理好的样品到各自的微孔中，加入50μL以缓冲液稀释的草甘磷抗体，25~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗三次，加以缓冲液稀释的100μLEu³⁺-羊抗鼠抗体，25~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗六次，加200μL增强液振荡5分钟后测量荧光强度cps，从标准曲线计算样品中的草甘磷含量。