[发明专利]一种用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括 a）固定液，b）渗透液，c）洗涤液，d）封闭液，e）单克隆抗体P^16INK4A，f）生物素-兔抗鼠IgG复合物，g）量子点（QDs）标记的链霉亲和素（SA）复合物探针即QD-SA。

2.根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的固定液是0.01M pH 7.6 三羟基氨基甲烷-盐酸（TBS）缓冲液，与多聚甲醛溶液按体积百分比100：4配制。

3.根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的渗透液是0.01M pH 7.6 TBS缓冲液，与吐温-20按体积百分比100：0.1配制。

4.根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的洗涤液是0.01M pH 7.6 TBS缓冲液，与牛血清白蛋白BSA按质量百分比100：1配制。

5.根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的封闭液是0.02M pH 7.6 TBS缓冲液，与正常兔血清按体积百分比100：10，并与牛血清白蛋白BSA按质量百分比100：5配制。

6.根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的量子点为CdSe、CdTe、CdSe/ZnS、CdTe/ZnS、CdTe/CdSe、InP、InAs、InGaAs、InGaP、InGaP/ZnS 中的一种或任意几种纳米粒子的组合。

7.根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的生物素-兔抗鼠IgG复合物制备方法如下：

（1）取15 mg 生物素，3.6 mg N-羟基丁二酰亚胺（NHSS），2.4 mg 乙基3-（3-二甲氨基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）溶解于2 mL 0.02 M pH 6.5 PBS缓冲液中；

（2）将5.3 mg兔抗鼠IgG抗体加入到上述溶液中，室温置于混匀仪上搅拌30 min；

（3）将上述溶液减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS和去离子水中透析1 d；透析结束将得到的溶液置于-20℃储存。

8. 根据权利要求1所述的用于检测宫颈癌的量子点免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述的QD-SA复合物制备方法如下：

（1）取200μL 8.3μM 量子点，采用活泼酯法，按照摩尔比1:500分别加入0.166mgEDC及0.166mgNHS，溶于300μL pH 5.5的硼酸盐缓冲液，室温反应5-10min；

（2）调整溶液pH到8-8.5，按摩尔比40:1加入4.38mg SA，持续混匀2h后，加入终浓度为2%的氨基葡萄糖反应45min终止反应；

（3）偶联所得量子点标记的SA复合物10000r·min-1，离心5min，除去少量沉淀后，用pH 7硼酸盐缓冲液在100K超滤管中洗涤，最后重悬于0.2mL pH 7的硼酸盐缓冲液中。