[发明专利]一种细胞法生产手性烯醇的方法

权利要求书

1.一种挪威假丝酵母细胞生物催化制备(2S,3R)-1,2-（亚环己基二氧基）庚-6-烯-3-醇的方法，其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.6-0.7，pH为6.5，加入吸附了底物R-亚环己基甘油醛与4-溴-1-丁烯的苎麻纱布，使底物R-亚环己基甘油醛添加量为80-90 g/L，底物R-亚环己基甘油醛与底物4-溴-1-丁烯摩尔比为1，葡萄糖含量为 20-25g/L，木糖13-15 g/L，山梨坦单月桂酸酯含量为19-20g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至27-28℃时，加入湿酵母细胞使浓度为22-26g/L，通气比为0.15-0.18V/（V分钟），进行生物催化反应，反应时间为86-92小时；反应结束后，分别滤出细胞、苎麻纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取苎麻纱布，合并乙酸乙酯萃取液和萃取苎麻纱布的乙酸乙酯，蒸出乙酸乙酯，得到产物(2S,3R)-1,2-（亚环己基二氧基）庚-6-烯-3-醇，反应转化率94-96％，产品收率92-94％，对映体过量率（ee%）97-98％。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于湿酵母细胞制备过程如下：挪威假丝酵母经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，装料系数为0.6-0.7，121℃高压灭菌30分钟，冷却至30-31℃，将挪威假丝酵母种子液接种至发酵罐，接种比例为8-10％，通气比为0.5-0.8V/（V分钟），30-31℃培养30-36小时，用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞，用作生物催化反应催化剂。

3. 权利要求1所述的方法，其特征在于种子培养基成份为: 酵母提取物10 g/L，葡萄糖20 g/L，蛋白胨20 g/L，pH自然; 配制固体培养基时添加15g/L的琼脂粉；

培养液成份为：葡萄糖25-30 g/L，甘油25-30 g/L，玉米胚芽粉30-40 g/L， KH₂PO₄ 9-11 g/L，MgSO₄.7H₂O 0.3-0.4 g/L，pH值为6.0。

4. 权利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附了底物的苎麻纱布制作方法为，将底物R-亚环己基甘油醛和4-溴-1-丁烯混溶，R-亚环己基甘油醛与4-溴-1-丁烯摩尔比为1，用尺寸为0.5cmX0.5cm的苎麻纱布吸收此溶液，即得到吸附了底物的苎麻纱布，调节底物与苎麻纱布用量，使得底物与苎麻纱布的质量比率为0.36-0.38。