[发明专利]一种高效的肿瘤个体化免疫治疗方法及其应用

权利要求书

1.在肿瘤临床个体化免疫治疗方案中使用调节性T细胞抑制药物提高临床治疗效果的方法。

2.权利要求1中所述调节性T细胞抑制药物为环磷酰胺。

3.权利要求1中所述肿瘤临床个体化治疗方案为：

从肿瘤患者手术切除的肿瘤组织中纯化自体gp96-肿瘤抗原复合物；

肿瘤患者手术后8周内开始皮下注射该自体复合物，每7天注射1次，至少注射6次。

4.权利要求1中所述调节性T细胞抑制药物使用方法为每次注射抗原复合物前1-3天内静脉注射400mg环磷酰胺。

5.权利要求3所述肿瘤患者种类为食管癌患者、肺癌患者、胰腺癌患者、结肠癌患者、直肠癌患者、肝癌患者、肾癌患者、胃癌患者、神经胶质瘤患者等。

6.权利要求3种所述抗原复合物纯化过程为：

a)将权利5中所述组织在NaHCO3中机械研磨破碎、高速离心制备组织裂解液

b)将步骤a）中组织裂解液pH调节到7.5；以0.15cm/min的径流速上样到Con A亲和层析柱；以0.15cm/min的径流速冲洗ConA层析柱30倍层析柱柱体积200mM PBS溶液；以0.15cm/min的径流速洗脱ConA层析柱亲和组分，洗脱缓冲液为浓度100g/L的α-甲基葡萄糖苷200mM PBS溶液，洗脱体积为3倍层析柱柱体积，洗脱过程为洗脱液洗脱2体积、停滞40分钟、洗脱液洗脱1体积、200mM PBS溶液洗脱1体积

c)将b）中的4体积洗脱液以1.2cm/分钟的径流速上样到Hitrap Q强阴离子层析柱；以1.2cm/分钟的径流速冲洗杂蛋白，缓冲液依次分别是PB 2个层析柱柱体积、200mM PBS 10个层析柱柱体积、300mM PBS 30个层析柱柱体积；以1.2cm/分钟的径流速洗脱目标组分，缓冲液为600mM PBS，洗脱4个层析柱柱体积

d)步骤c）中得到的洗脱组分即为目的自体gp96抗原复合物。