[发明专利]食用油样品中游离甾醇组份分析方法及地沟油鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食用油样品中游离甾醇组份分析方法及地沟油鉴别方法，可用于对食用油中的游离植物甾醇和胆固醇进行定性和定量分析，并可依据判别因子对地沟油进行鉴别。

背景技术

食用油的质量和安全已经成为公众关注的一个热点问题。广义的“地沟油”包括地沟油、潲水油(泔水油)、煎炸老油、以及由动物下脚料等炼制的油脂。一些通过精炼的“地沟油”在色泽、气味、过氧化值、酸价、碘价等理化指标方面和正常的食用油脂没有明显的区别，给食用油的质量监督和安全管理带来了很大的困难。由于利益的诱惑，一些不法商贩将精炼的“地沟油”当作食用油或者按照一定的比例添加到正常的食用油中进行销售。研究表明：“地沟油”由于发生了氧化和酸败，生成了大量的小分子的醛、酮、酸和烃类化合物，以及由于油脂在高温下发生的热聚合和氧化热聚合作用，也形成了一定的环烃、环氧烃、聚脂类和苯并比等，再加上一些环境污染物，如重金属离子、黄曲霉毒素等，这就导致其存在很大的安全隐患，长期食用具有致病和致癌的风险。目前我国尚未建立检测“地沟油”的统一标准。

甾醇是广泛存在于生物体内的一种重要的生物活性物质，每种植物油都有自己特定甾醇组成模式，它们也是油脂不皂化物的重要组成部分。植物油中常见的植物甾醇有菜油甾醇、芸薹甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、△⁵-燕麦甾烯醇、△^5,23-豆甾二烯醇、△^5,24-豆甾二烯醇、△⁷-豆甾烯醇等，而动物油中甾醇则以胆固醇为主。“地沟油”由于经过反复使用，与动物油脂的接触概率较高，往往含有较高的胆固醇。另外，“地沟油”通常经过高温煎炸和反复精炼处理，其甾醇组成模式也会发生变化，因此可以通过确定食用油中甾醇的种类和特定甾醇之间的比例关系来确定可能存在的“地沟油”。

目前食用油中甾醇类化合物的检测方法主要有气相色谱-火焰离子检测(GC-FID)和气相色谱-质谱(GC-MS)法。这类方法在进样前，样品都需要经过复杂的前处理，如油脂的皂化、不皂化物的提取、氧化铝柱层析、薄层层析等，过程耗时费力，而且需要消耗较多的有机溶剂，不能满足日常环保、快速的要求(ISO 12228:1999,Food Chemistry 2013,136,251-258,Food Research International,2011,44,103-108)。另外，GC-FID在分析食用油样品中含量较低的甾醇时往往能力不足，并且特别容易受到样品中基质的干扰，对于微量甾醇的定量误差较大；同时一维气相色谱和全二维气相色谱相比，其色谱分离能力不足，对于甾醇的一些同分异构体往往不能达到满意的分离效果，给单个甾醇精确定量带来干扰。因此，发明一种快速、简便、环保的食用油中游离甾醇的分离和检测方法具有重要的实际应用价值。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种食用油样品中游离甾醇组份分析方法及地沟油鉴别方法，具体来讲就是将食用油样品经过固相萃取处理，分离出其中的游离甾醇，最后再将游离甾醇化合物硅烷化衍生后，用全二维气相色谱-飞行时间质谱进行检测，并对食用油中的游离植物甾醇和胆固醇进行定性和定量分析。进一步基于该方法分析结果可用于地沟油的鉴别。该方法与传统甾醇化合物分析方法相比，具有灵敏、快速、高效的特点。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

提供一种食用油样品中游离甾醇组份分析方法：将待测食用油样品中经过固相萃取处理，分离出其中的游离甾醇，再将游离甾醇进行硅烷化衍生后注入全二维气相色谱-飞行时间质谱进行检测，然后对食用油样品中的甾醇类化合物进行定性和定量分析。

按上述方案，所述全二维气相色谱-飞行时间质谱分析所用的优选条件为：进样口温度300～320℃，以氦气为载气，流速为0.7～1mL/min，分流比为15～20：1，调制器温度补偿为35～40℃；调制周期为3s，其中热吹时间为1.15s，冷吹时间为0.35s；传输线温度设在310～315℃；质谱扫描范围：从50m/z到700m/z，溶剂延迟为500～700s，检测器电压为1650～1750V，离子源温度设在230～250℃。