[发明专利]一种桃金娘组培快繁技术

说明书

技术领域

    本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种桃金娘组培快繁技术。

背景技术

 桃金娘（Rhodomyrtus tomentosa（Ait.） Hassk）又名稔子、山稔，为桃金娘科桃金娘属常绿多花小灌木，是一种目前尚未进行规模开发利用的食品新资源，具有较高的研究价值和应用前景。我国野生桃金娘植物资源丰富，是华南地区绿化荒山，保持水土的优良品种，耐旱瘠，适应性强。

桃金娘的利用价值高，其果实很早就引起人们的关注，但其开发利用进展较慢。目前华南地区的一些地方正在发展规模化桃金娘种植，优质桃金娘种苗是制约其规模化种植的难题之一。然而，目前桃金娘种苗主要依靠种子繁殖，但其发芽率低，而且实生苗分化明显，个体之间各种性状差异大。因此，非常有必要建立一套完整的桃金娘组培快繁技术。目前，完整的桃金娘组培快繁技术尚未见有报道。

发明内容

    本发明的目的在于提供出一种桃金娘组培快繁技术，通过外植体的采集及预处理、初代培养、增殖培养、生根培养、炼苗及移栽等过程，从而实现了本发明的目的。

本发明的一种桃金娘组培快繁技术，包括以下的步骤：

（1）外植体的采集与处理：选择桃金娘优良单株的当年生腑芽饱满枝条，去叶后于洗衣粉水浸泡10～30min，刷净后自来水冲洗1～2h，剪成长1～3cm带腋芽的茎段，先用75%乙醇消毒5～30s后用无菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒10～25min，用无菌水冲洗4～6次后备用。

（2）初代培养：将步骤（1）的茎段接种到初代培养基上,先在25～28℃条件下全暗培养30～45天，然后置于每天光照10～12小时，光照强度为1500～3000lx，直至诱导形成不定芽。

（3）增殖培养：将步骤（2）的不定芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养7～14天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为3000～5000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养，45～60天转接一次。

（4）生根培养：将步骤（1）或（2）高度约为3～5cm的丛生芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养7～14天，然后置于每天光照14～16小时，光照强度为5000～6000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根。

（5）炼苗移栽：将高约8～10cm的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土和黄沙泥混合成的基质中并定植于大田中。

上述步骤（2）所述的初代培养基为：MS+6-BA1.0～1.5mg/L+NAA0.2～0.5mg/L+CPPU0.01～0.5 mg/L+ Ad1.0～3.0mg/L+蔗糖15～30g/L+琼脂3.5～6.0g/L，pH为5.4～5.8。

上述步骤（3）所述的增殖培养基为：MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.2～0.5mg/L+IBA0.2～0.5mg/L+ Ad1.0～3.0mg/L+蔗糖15～30g/L+琼脂3.5～6.0g/L，pH为5.4～5.8。

上述步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+IBA0.4～1.2mg/L+GGR1.0～2.0mg/L+PG10～40mg/L+蔗糖15～30g/L+琼脂3.5～6.0g/L，pH为5.4～5.8。

目前国内关于桃金娘组培快繁技术尚未有报道，而本发明具有简单、易行、经济的特点。通过本发明育成的桃金娘试管苗移栽成活率达到95%以上，可以有效解决桃金娘规模化种植中的优质桃金娘种苗供应问题。

具体实施方式

     以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。

实施例1

（1）、外植体的采集与处理：选择桃金娘优良单株的当年生腑芽饱满枝条，去叶后于洗衣粉水浸泡15min，刷净后自来水冲洗1h，剪成长1～3cm带腋芽的茎段，先用75%乙醇消毒8s后用无菌水洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒20min，用无菌水冲洗5次后备用。