[发明专利]一种同时测定卡培立肽中的DMF、NMP和DMSO杂质的方法

权利要求书

1.一种能够同时测定多肽药物卡培立肽中浓度范围分别为0.2～5000ppm的N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮和二甲基亚砜杂质的液相色谱分析方法，其步骤包括：

(1)准确称取一定量的样品，经流动相B溶解，制成每1ml中含样品约5mg的溶液；

(2)直接将样品进行液相色谱分析，计算得出样品中N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮和二甲基亚砜的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中的流动相B包括纯水、乙腈、甲醇、甲醇水溶液等，优选为磷酸水溶液和乙腈按比例为0～100:1混合的混合液，其中磷酸水溶液中的磷酸含量为0～5％(v/v)，优选为0.05％(v/v)。

3.根据权利要求1-2任一所述的方法，其特征在于，步骤(2)中样品的进样浓度为0.5～100mg/ml，优选为5mg/ml。

4.根据权利要求1-2任一所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的液相色谱分析条件为：

1)色谱柱是C8、C18色谱柱，色谱柱长为5～25cm，内径：2.1～4.6mm，粒径：2.1～5μm；色谱柱优选为Welch UItimate SiO2(4.6×250mm，5μm)、Merck ZIC-HILIC(250mm×2.1mm，3.5um)；最优选为Agilent Zorbax RX-SIL(4.6×250mm，5μm)或其等效柱；

2)进样量为1～200微升，柱温为20～60度，优选为30～35度；

3)检测器为紫外检测器，检测波长为190～210nm，流速为0.2～2mL/min，优选为1mL/min；

4)洗脱方法为：以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，梯度为：流动B的含量：0％～100％；所述的流动相A包括纯水、乙腈、甲醇、甲醇水溶液等，优选为磷酸水溶液和乙腈按比例为1:0～100混合的混合液，其中磷酸水溶液中的磷酸含量为0～5％(v/v)，优选为0.05％；最优选的，所述流动相A按照0.05％(v/v)的磷酸水溶液：乙腈的比例为10:90配置，所述流动相B按照0.05％(v/v)的磷酸溶液：乙腈的比例为50:50配置。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤4)所述的洗脱方法的步骤为：

(a)0～8min时，流动相B为0，流动相A为100％；

(b)随后增加流动相B的比例，至10～25min时，流动相B的比例为100％，流动相A为0；

(c)随后降低流动相B的比例，至26～35min时，流动相B为0，流动相A为100％，至35min时洗脱结束。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，待测样品中目标成分的定量方法为外标法。