[发明专利]山莨菪根的HPLC指纹图谱检测方法有效
| 申请号: | 201410484686.6 | 申请日: | 2014-09-19 |
| 公开(公告)号: | CN104215717A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 |
| 发明(设计)人: | 马逾英;蒋运斌;苟琰;袁茂华 | 申请(专利权)人: | 成都中医药大学 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/86 |
| 代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;杜朗宇 |
| 地址: | 611137 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 莨菪 hplc 指纹 图谱 检测 方法 | ||
1.山莨菪根的HPLC指纹图谱检测方法,其特征在于:它包括如下操作步骤:
(1)供试品溶液的制备:取待检药材,粉碎后,以甲醇提取,提取液过滤,制备供试品溶液;
(2)将供试品溶液注入高效液相色谱仪中,在如下色谱条件下检测即可:
色谱柱:十八烷基键合硅胶柱;检测波长:210±3nm;流速0.8~1.2mL/min;柱温30±5℃;
流动相:A(乙腈)―B(10mmol/L KH2PO4缓冲液,用H3PO4调节pH至2.5~4.0),梯度洗脱程序为:0~5min,10%;5~40min,10%~25%;40~41min,25%~90%;41~50min,90%~90%;50~55min,90%~10%;55~60min,10%~10%。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述色谱柱尺寸为5μm,4.6×250mm。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述色谱柱为Ultimate AQ C18柱。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:检测波长为210nm。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:流速为1.0mL/min。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:柱温为30℃。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,提取方法为回流、浸渍或超声。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:将供试品色谱图与对照指纹图谱进行对比,相似度大于0.850的药材即为山莨菪根;所述对照指纹图谱中有15个共有峰,以阿托品为对照,各共有峰的相对保留时间为:峰1:0.281,峰2:0.336,峰3:0.353,峰4:0.413,峰5:0.493,峰6:0.576,峰7:0.613,峰8:0.724,峰9:0.793,峰10:0.897,峰11:1.000,峰12:1.235,峰13:1.346,峰4:1.439,峰15:1.569。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:所述对照指纹图谱中各共有峰的相对峰面积为:峰1:0.205~9.169、峰2:0.059~4.681、峰3:0.033~2.253、峰4:0.017~1.991、峰5:0.047~30.551、峰6:1.673~123.29、峰7:0.505~39.002、峰8:0.076~1.637、峰9:0.158~15.372、峰10:0.247~17.305、峰11:1.000、峰12:0.427~11.843、峰13:0.016~2.53、峰14:0.02~0.474、峰15:0.005~0.925。
10.根据权利要求8或9所述的方法,其特征在于:所述对照指纹图谱如图1所示。
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