[发明专利]一种莱克多巴胺半抗原、人工抗原、单克隆抗体及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201410471148.3 | 申请日: | 2014-09-16 |
| 公开(公告)号: | CN104311438B | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
| 发明(设计)人: | 乔春华;吴康;许芸芸 | 申请(专利权)人: | 苏州大学 |
| 主分类号: | C07C229/34 | 分类号: | C07C229/34;C07C227/18;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/577;G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京万慧达知识产权代理有限公司11111 | 代理人: | 张金芝,杨颖 |
| 地址: | 215123 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 多巴胺 半抗原 人工 抗原 单克隆抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种莱克多巴胺半抗原,其结构式为下式Ⅰ:
2.根据权利要求1所述的一种莱克多巴胺半抗原的制备方法,包括如下步骤:化合物1通过溴代反应得到中间体2;所述中间体2与丙烯酸乙酯反应得到中间体3;所述中间体3经还原反应得到中间体4;所述中间体4与化合物5反应得到中间体6;所述中间体6经水解反应得到所述莱克多巴胺半抗原7;
3.根据权利要求2所述的一种莱克多巴胺半抗原的制备方法,其特征在于包括如下步骤:(a)将所述化合物1溶于乙腈中,加入N-溴代丁二酰亚胺,所述化合物1与所述N-溴代丁二酰亚胺的加入量之比为1:1~1.5倍当量,室温下反应2-4h,得到所述中间体2;(b)在所述中间体2中加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯,抽换氮气,加入三乙胺、N,N-二甲基甲酰胺和丙烯酸乙酯,再次抽换氮气,90-110℃下回流搅拌反应15-20h,得到所述中间体3;(c)在所述中间体3中加入甲醇和催化剂Pd/C,抽换氢气,室温下反应3-6h,得到所述中间体4;(d)将所述中间体4溶于甲醇中,加入化合物5、三乙胺搅拌反应10-30min,加入三乙酰氧基硼氢钠,36-60℃下回流搅拌反应20-30h后,得到所述中间体6;(e)将所述化合物6溶于甲醇中,加入NaOH,50-70℃下回流搅拌反应5-7h,得到所述莱克多巴胺半抗原RAC-CA。
4.根据权利要求1制备的一种莱克多巴胺人工抗原,其结构式如下式Ⅱ:
5.根据权利要求4所述的一种莱克多巴胺人工抗原的制备方法,其特征在于:将所述莱克多巴胺半抗原与牛血清白蛋白偶联得到所述莱克多巴胺人工抗原。
6.根据权利要求4所述的一种莱克多巴胺人工抗原制备的一种莱克多巴胺单克隆抗体,其特征在于:所述莱克多巴胺单克隆抗体是由杂交瘤细胞株12B2分泌,所述杂交瘤细胞保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号(CCTCC NO)是:C2014127。
7.根据权利要求1所述的莱克多巴胺半抗原,或权利要求4所述的莱克多巴胺人工抗原在制备所述莱克多巴胺单克隆抗体中的应用。
8.根据权利要求1所述的莱克多巴胺半抗原,或权利要求4所述的莱克多巴胺人工抗原在莱克多巴胺定性及定量检测中的应用。
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