[发明专利]载盐霉素胶束及其制备方法和应用

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域，具体的说，涉及一种载盐霉素胶束联合穿膜肽CRGDK靶向肝癌干细胞的药物制剂，及其制备与应用。

背景技术：

肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，由于其恶性程度高、病情进展快，加上早期无明显症状以致就诊时肝脏已经受到严重损害，故治疗难度大、疗效差，病死率高，被称“癌中之王”。因此，肝癌的预防和治疗成为我国医药研究的一项重要任务。

由于肝癌发生时肝脏已经受到严重损害，因此导致具体治疗选择受到很大制约。目前尽管生物治疗与单一的手术治疗、放疗、化疗相比取得了很大的进展，但手术切除和肝癌移植仍是治疗肝癌的主要方法。然而长期随访发现多数肝癌根治性切除手术后仍发生肿瘤复发转移，其术后一年的复发率达3至4成，是乳腺癌的4倍。此外，传统的肝癌化疗进展不大，可能与多耐药基因有关。常用化疗药物仍为顺铂、阿霉素或表阿霉素、丝裂霉素、5-氟脲嘧啶或氟苷等。然而这些化疗药物不仅全身毒性严重，且通常也无明显疾病缓解或延命效果。目前的治疗方法存在一个共同问题：这些疗法中用于肝癌治疗的一线药物针对的都是已分化的肿瘤细胞，可以在较短时间内杀灭这类细胞，使肿瘤体积减小甚至消失，然而难以根除肝癌的复发，没有从根源上对肝癌进行治疗。因此肝癌迄今尚还处于一种严重缺乏有效治疗药物的尴尬境地。

随着人们对肝癌医学理论及临床实践的深入研究，特别是肿瘤分子生物学的飞速发展，越来越多的证据证明，肿瘤组织中存在一小部分具有高度增殖能力与自我更新能力的细胞群体，也具备多向分化的潜能。这类细胞被称为肿瘤干细胞(tumor stem cell,TSC)。它的数目极其稀少，但成瘤能力较普通肿瘤细胞大数百倍以上，是肿瘤发生、发展与维持的基础。TSC可以长时间处于休眠状态并具有多种耐药分子而对杀伤肿瘤细胞的外界理化因素不敏感，被认为是肿瘤治疗失败和肿瘤复发的主要原因之一。因此，靶向肿瘤干细胞治疗为从本质上根除肿瘤提供了一条新的途径。

盐霉素是一种从白色链霉素的发酵液中分离提取得到的聚醚类离子载体型抗生素。它广泛应用于畜禽类动物鸡球虫病的防治，并且还能作为饲料添加剂以促进畜禽的生长。自2009年Gupta发表在CELL的文章中指出他们用高通量的方法发现盐霉素可以降低肿瘤干细胞的比例，其效力是常用抗乳腺癌药物紫杉醇的100倍后，盐霉素开始成为一种新型抗肿瘤药物受到研究人员的广泛关注(Gupta PB,Onder TT,Jiang G,等.Identification of selective inhibitors of cancer stem cells by high-throughput screening[J].Cell,2009,138(4):645～659.)。近些年关于盐霉素对人肿瘤细胞和肿瘤干细胞的研究突出表明了盐霉素优于传统化疗药，尤其是它可以通过一种或几种药物机制来诱导正常癌细胞和进展非常缓慢的肿瘤细胞的凋亡，也可以改变肿瘤干细胞对放、化疗的敏感性，或与其他抗癌药物联用来诱导肿瘤干细胞分化为较成熟细胞，提高其对治疗的敏感性。盐霉素不仅杀死了肿瘤干细胞，同时也消灭了正常肿瘤细胞和对细胞毒性药物，放射物，促进细胞凋亡药物的抵抗性较强的高度休眠的肿瘤细胞。目前，盐霉素被认为是三刃刀来对抗癌症，为临床恶性肿瘤的治疗提供了新的方向。

然而高浓度的TSC存在于实体瘤中含氧量低以及坏死的部位，游离的抗肿瘤药物不仅对基体存在较大毒性，也很难在整个肿瘤中均匀分布来渗透致死浓度进入TSC中。药物靶向传递并不令人十分满意，由于肿瘤血管结构紊乱以及肿瘤内部高的组织间隙压导致大多数靶向药物传递系统只能渗透3-5个细胞直径，并且主要沉积在周围的肿瘤血管中。因此需要一种载体能有效的包载游离药物、高效渗透肿瘤内部并选择性地杀伤肿瘤细胞，减少非靶向器官的药物积聚，降低对机体的毒副作用。文献报道，一种新型的线肽CRGDK(穿膜靶向肽，氨基酸序列为Cys-Arg-Gly-Asp-Lys)当结合或协同抗癌药物给药时可以显著提高抗癌药物进入实体瘤的渗透性(Gill KK,Kaddoumi A,Nazzal S.Mixed micelles of DSPE-PEG2000and vitamin-E TPGS for concurrent delivery of paclitaxel and parthenolide:Enhanced chemosenstization and antitumor efficacy against non-small cell lung cancer(NSCLC)cell lines[J].Eur J Pharm Sci,2012,46(1–2):64～71.)。