[发明专利]一种分步提取与生物转化偶联制备海带降血压制品的方法

说明书

技术领域

本发明属于海洋食品精深加工领域，具体涉及一种分步提取和生物转化偶联制备辅助降血压保健海带制品的方法。

背景技术

高血压是引起心脑血管疾病的重要危险因子，已成为严重的国际公共卫生问题，然而，目前市场上所销售的降血压药物大多为化学合成药物，长时间服用易产生相应的副作用，引起身体不适。因此研发一种安全性高、副作用小、易吸收的食源性降血压制品将十分重要。

海带营养丰富、功能众多，有“碱性植物之冠”之称，具有很高的经济价值，不但可以食用，补充人体内所需营养，而且在医疗保健方面有更多功用，如降血压、降血脂及抗癌等，是医药工业宝贵的原材料。据资料记载，古往今来，食用海带降低血压是我国民间普遍使用的有效方法，日本也有通过饮用海带浸泡液来降低血压的民间习俗。由此可见，海带为降血压制品的研发提供了高品质的资源。

我国海带总产量跃居世界首位，而利用率却仅为30%，行业总体加工水平偏低，仅限于初级加工产品形式（如海带丝、海带结等）以及单一物质的提取（如甘露糖醇、褐藻酸钠等），加工副产物中的褐藻糖胶、活性多肽、膳食纤维等优质资源则被当成废料废弃，造成了海带资源的极大浪费。例如，申请号为201310101070.1的发明专利“一种海带营养成分的制备方法”（申请时间为2013.03.26），是以海带为原料，采用微波提取法分步提取海带中的甘露糖醇、低级性营养成分及多糖蛋白混合物等几种营养成分。该专利大体上实现了海带的综合利用，得到了海带的营养成分混合粗提物，但尚未得到具体的单一成分，也未能将营养成分的具体功效加以研究利用，经济价值不高，不足以实现海带的高值化利用，且步骤操作复杂，耗能巨大。

因此，开发一种分步提取和生物转化偶联制备海带降血压制品的方法，不仅能获取甘露糖醇、褐藻胶、褐藻糖胶等单一组分的营养物质，且可以生物转化得到短链活性小肽，科学配伍得到具有降血压功效的海带制品，实现了海带高值化利用，且降低能耗、减少污染、节约成本，同时实现海带资源回收利用，大大提升海带产品附加值，进而带动和促进海带产业的发展。

发明内容

本发明目的在于提供一种以海带为原料，分步提取与生物转化偶联制备降血压制品的方法，以解决上述技术中存在的难题并实现海带高值化综合利用，进而大幅度提高海带的附加值，降低海带的资源浪费，同时降低生产成本，实现节能降耗。

 上述一种分步提取与生物转化偶联制备海带降血压制品的方法包括以下步骤：

1）原料预处理：新鲜海带或海带下脚料清洗除杂后，60 ℃低温烘干至恒重，粉碎成80~200目粉末，备用；

2）醇提甘露糖醇：将步骤1）中粉末与95wt.%乙醇以固液比为1:25~1:30进行循环超声辅助提取，时间50~60min，温度50~55℃，减压抽滤，滤渣真空干燥后备用；滤液浓缩后趁热抽滤，0 ℃下析晶，过滤干燥得海带甘露糖醇产品；

3）酸提褐藻胶及褐藻糖胶：将步骤2）中滤渣与0.1mol·L^-1盐酸溶液以固液比为1:35~1:50进行循环超声辅助提取，时间40~50min，温度为50~60℃，离心备用；

4）醇沉褐藻胶及褐藻糖胶：将步骤3）中上清液用30~40wt.%乙醇沉淀，离心收集沉淀，无水乙醇洗涤即得褐藻胶，提取完褐藻胶的上清液用60~70wt.%的乙醇沉淀，离心收集沉淀、无水乙醇漂洗即得褐藻糖胶；收集上清液，与步骤3）中滤渣混合浓缩，冷冻干燥备用； 

5）梯度生物转化：以ACE抑制活性为指标，将步骤4）中冷冻干燥物按固液比1:20~1:40，酶添加量2~8%（w/w）依次加入不同的蛋白酶，按蛋白酶的最佳反应条件可控酶解4~6 h，90 ℃灭酶15~20 min，离心收集上清液；沉淀经真空干燥即为海带膳食纤维粗品；

6）超滤：步骤5）中上清液进行超滤处理，截留10000 Da分子量以下组分，冷冻干燥得海带降血压肽；

7）科学配伍：将上述步骤中所得的5个海带降血压功能组分进行科学配伍，获得系列海带降血压制品；

8）活性检测：将步骤7）所制得的海带降血压制品进行体外ACE活性抑制检测，检测该制品抑制ACE活性的IC₅₀值0.68~1.15mg/g。

所述梯度生物转化中不同蛋白酶依次可控酶解顺序为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶。

所述工艺，先将海带中甘露糖醇、褐藻胶、褐藻糖胶等成分采用超声循环分步提取，降低其对海带蛋白酶解的干扰作用，提高水解效率，并实现海带综合利用。