[发明专利]一种分步提取与生物转化偶联制备海带降血压制品的方法

权利要求书

1.一种分步提取与生物转化偶联制备海带降血压制品的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）原料预处理：新鲜海带或海带下脚料清洗除杂后，60℃低温烘干至恒重，粉碎成80~200目粉末，备用；

2）醇提甘露糖醇：将步骤1）中粉末与95wt.%乙醇以固液比为1:25~1:30进行循环超声辅助提取，时间50~60min，温度50~55℃，减压抽滤，滤渣真空干燥后备用；滤液浓缩后趁热抽滤，0 ℃下析晶，过滤干燥得海带甘露糖醇产品；

3）酸提褐藻胶及褐藻糖胶：将步骤2）中滤渣与0.1mol·L^-1盐酸溶液以固液比为1:35~1:50进行循环超声辅助提取，时间40~50min，温度为50~60℃，离心备用；

4）醇沉褐藻胶及褐藻糖胶：将步骤3）中上清液用30~40wt.%乙醇沉淀，离心收集沉淀，无水乙醇洗涤即得褐藻胶，提取完褐藻胶的上清液用60~70wt.%的乙醇沉淀，离心收集沉淀、无水乙醇漂洗即得褐藻糖胶；收集上清液，与步骤3）中滤渣混合浓缩，冷冻干燥备用； 

5）梯度生物转化：以血管紧张素转化酶抑制活性为指标，在步骤3）0.1mol·L^-1盐酸轻度水解的基础上，将步骤4）中冷冻干燥物按固液比1:20~1:40，酶添加量为2~8wt.%依次加入不同的蛋白酶，按蛋白酶的最佳反应条件可控酶解4~6 h，90 ℃灭酶15~20 min，离心收集上清液；沉淀经真空干燥即为海带膳食纤维粗品；

6）超滤：步骤5）中上清液进行超滤处理，截留10000 Da分子量以下组分，冷冻干燥得海带降血压肽；

7）科学配伍：将上述步骤中所得的5个海带降血压功能组分进行科学配伍，获得系列海带降血压制品。

2.根据权利要求1所述分步提取和生物转化偶联制备海带降血压制品的方法，其特征在于：所述梯度生物转化中不同蛋白酶依次可控酶解顺序为风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶。

3. 一种如权利要求1所述方法制得的产品，其特征在于：所述工艺步骤可获得具有降血压功能的甘露糖醇、褐藻胶、褐藻糖胶、海带膳食纤维和海带降血压肽五个产品。

4. 一种如权利要求1所述方法制得的海带降血压制品，其特征在于：所述海带降血压制品中的五种产品按重量比例计为：甘露糖醇15~23%，褐藻胶18~21%，褐藻糖胶11~19%，降血压肽31~43%，膳食纤维16~25%。

5. 根据权利要求4所述方法制得的海带降血压制品，其特征在于：所述制品经体外降血压模型检测，具有显著的ACE抑制活性，其IC₅₀值为0.68 ~ 1.15 mg/g。