[发明专利]一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410463061.1 | 申请日: | 2014-09-12 |
公开(公告)号: | CN104255463A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 杨存 | 申请(专利权)人: | 南京通泽农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法 | ||
1. 一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:柳兰的种子经消毒处理,去掉外种皮接种在1/2WPM+NAA0.1-0.2mg/L+6-BA0.5-1mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,30天后,将诱导出来的愈伤组织接入培养基WPM+1-2mg/L6-BA+0.3-0.5mg/L2,4-D+150mg/L番茄汁培养基中进行继代培养,继代培养40天后接入附加了150mg/L红色红曲酶中进行液体悬浮细胞的培养,7-8天继代一次,取样,洗涤,烘干。
2. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:所述的消毒处理为:选用柳兰的种子,在肥皂水中浸泡30min,自来水冲洗1h,在超净工作台上用0.2%的升汞消毒15min,无菌水冲洗5遍至无残留溶液。
3. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:诱导愈伤组织的条件为暗光照,光照10h/d,温度21℃。
4. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:柳兰愈伤组织继代中添加了番茄汁,可以促进细胞的分裂生长。
5. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:悬浮细胞的培养方法为愈伤组织经过继代培养之后,挑选嫩绿松散的愈伤组织,放入液体培养基中,加入已消毒灭菌后的玻璃珠震摇,置于震荡培养箱中进行水平震荡培养,振幅2-4cm,震动频率90r/min,温度23℃,光照2500lx,光期12h/d。
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