[发明专利]一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法在审

专利信息
申请号: 201410463061.1 申请日: 2014-09-12
公开(公告)号: CN104255463A 公开(公告)日: 2015-01-07
发明(设计)人: 杨存 申请(专利权)人: 南京通泽农业科技有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 210046 江苏省南京市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法
【权利要求书】:

1. 一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:柳兰的种子经消毒处理,去掉外种皮接种在1/2WPM+NAA0.1-0.2mg/L+6-BA0.5-1mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,30天后,将诱导出来的愈伤组织接入培养基WPM+1-2mg/L6-BA+0.3-0.5mg/L2,4-D+150mg/L番茄汁培养基中进行继代培养,继代培养40天后接入附加了150mg/L红色红曲酶中进行液体悬浮细胞的培养,7-8天继代一次,取样,洗涤,烘干。

2. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:所述的消毒处理为:选用柳兰的种子,在肥皂水中浸泡30min,自来水冲洗1h,在超净工作台上用0.2%的升汞消毒15min,无菌水冲洗5遍至无残留溶液。

3. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:诱导愈伤组织的条件为暗光照,光照10h/d,温度21℃。

4. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:柳兰愈伤组织继代中添加了番茄汁,可以促进细胞的分裂生长。

5. 根据权利要求1所述的一种柳兰悬浮细胞的快速繁殖方法,其特征是:悬浮细胞的培养方法为愈伤组织经过继代培养之后,挑选嫩绿松散的愈伤组织,放入液体培养基中,加入已消毒灭菌后的玻璃珠震摇,置于震荡培养箱中进行水平震荡培养,振幅2-4cm,震动频率90r/min,温度23℃,光照2500lx,光期12h/d。

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