[发明专利]一种抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体及其应用无效
| 申请号: | 201410461482.0 | 申请日: | 2014-09-11 |
| 公开(公告)号: | CN104212770A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 |
| 发明(设计)人: | 李莉;王娟 | 申请(专利权)人: | 李莉;王娟 |
| 主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/28;G01N33/68;G01N33/577;A61K39/395;A61P17/00;A61P17/06;C12R1/91 |
| 代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 薛琦;沈利 |
| 地址: | 200080 上海市虹*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 fc 单克隆抗体 及其 应用 | ||
1.一种杂交瘤细胞株,其特征在于,其保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C201211。
2.一种抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌产生。
3.一种如权利要求2所述抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)体外培养权利要求1所述杂交瘤细胞株得到培养液;
(2)将步骤(1)所得培养液离心,收集上清纯化即得抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述培养的温度为37℃,培养的时间为24小时。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述离心的速度为3000rpm,离心的时间为5分钟。
6.一种细胞人FcεRⅠα亚基表达的检测方法,其特征在于,该检测方法包括以下步骤:
(1)将权利要求2所述抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体与待检测的分离的细胞或该细胞的裂解液进行接触;
(2)通过免疫荧光分析方法、流式细胞术分析方法、免疫印迹分析方法、ELISA分析方法、免疫组织化学分析方法或免疫沉淀分析方法来判断是否有阳性反应。
7.如权利要求6所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)所述细胞是真核细胞。
8.如权利要求6所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)所述免疫荧光分析方法包括以下步骤:取对数期生长期的目的细胞,PBS洗涤,离心收集细胞;将细胞接种于细胞培养板,加入多聚甲醛固定,每孔加入权利要求2所述抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体,温浴,洗涤后弃上清,每孔加入荧光标记的抗鼠IgG抗体,荧光显微镜观察结果。
9.如权利要求6所述的检测方法,其特征在于,步骤(2)所述流式细胞术分析方法包括以下步骤:取对数期生长期的目的细胞,PBS洗涤,离心收集细胞;在细胞中加入权利要求2所述抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体,温浴,洗涤后离心弃上清,加入荧光标记的抗鼠IgG抗体,上流式细胞仪检测结果。
10.如权利要求2所述的抗人FcεRⅠα亚基单克隆抗体在制备抗变应性皮炎、皮肌炎或银屑病药物中的用途。
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