[发明专利]从组合物中提取具有孕甾烷母核结构的化合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及从组合物中提取具有孕甾烷母核结构的化合物的方法。

背景技术

肾上腺皮质激素是由肾上腺皮质合成和分泌的甾体激素，具有孕甾烷母核。从肾上腺皮质中可提取出数十种甾醇类结晶。该类化合物主要功能是调节动物体内的水盐代谢和糖代谢，在各种脊椎动物中普遍存在。约有30种肾上腺皮质激素已被分离和鉴定，其中约10种有生物活性。以皮质醇的活性最强，具有调节糖、蛋白质和脂肪代谢的功能，可影响葡萄糖的合成和利用、脂肪的动员及蛋白质合成。目前，肾上腺皮质激素在药物中的应用主要包括以下几类：弱效的有醋酸氢化可的松；中效的有醋酸地塞米松(皮炎平)、丁酸氯倍米松、醋酸曲安奈德(去炎松)、丁酸氢化可的松(尤卓尔)、糠酸莫米松(艾洛松)、醋酸氟氢松；强效的有卤米松、丙酸倍氯米松、氯氟米松(乐肤液或喜乐)；最强效的有丙酸氯倍他索(特美肤或恩肤霜或皮康王)、卤美他松(适确得或奥能软膏)、丁酸氯倍他松(百多邦)、二丙酸倍他米松，等等。该类药物的衍生结构示意如下：

市场上这些肾上腺皮质激素类药物广泛作为局部用药，用于治疗皮肤病，因此产品中含有肾上腺皮质激素成分的组合物应用广泛。如何快速的从组合物中分离肾上腺皮质激素类化合物及其衍生物(降解杂质)，并顺利进行下一步的测试，对产品的生产和贮存，以及市场的抽检都具有重要的意义。

然而，由于肾上腺皮质激素类药物种类繁多，不同药物使用的辅料又不尽相同，一般针对具体的肾上腺皮质激素成分采用不同的提取方法。已有方法通用性差，对于多种类型药物的提取，就需要准备不同的试剂，进行不同的操作，测试人员容易混淆，而且提取效果差，最严重的问题是还会干扰后续的测试。例如：

丁酸氯倍他松乳膏进口注册标准(JX20070012)，其选取丙酸氯倍他索，加乙醇制成内标溶液。称取样品，置具塞锥形瓶中，加内标溶液5ml和乙醇15ml，98-100℃水浴中加热，充分振摇使乳膏完全溶解，放冷，置冰浴中冷却1小时以上，取出，离心，过滤取滤液，即得供试溶液。该提取方法于98-100℃水浴加热丁酸氯倍他松乳膏，溶剂挥发较多，操作繁琐，不安全；选择加入内标，不经济；丁酸氯倍他松在98-100℃水浴加热，会发生水解，其降解产物如下式所示。此外，一般肾上腺皮质激素化合物含量和有关物质测定使用HPLC测定，乙醇作提取溶剂会有较大的溶剂效应，测定峰形较差。

另有卤米松乳膏进口注册标准(JX20010092)，取卤米松乳膏适量置烧杯中，加四氢呋喃适量，搅拌使溶解摇匀，置冰浴中放置30分钟，滤过取滤液，作供试液。该提取方法中，使用的四氢呋喃试剂是环醚，容易被空气氧化，产生一定的杂质，常加入BHT(2，6-二叔丁基对甲本酚)；另外，四氢呋喃将样品中的基质全部溶解，冰浴时未除去基质，因此，得到的色谱峰基线较差，干扰大，峰形较差，杂质也增多。

另有中国药典二部2010年版丙酸氯倍他索乳膏含量测定法，加入醋酸氟轻松做内标，用甲醇做溶剂提取测定含量。该方法也加入内标，操作繁琐，不经济，基质除去不彻底。

前些年国内外对外用制剂药品有关物质的研究不够深入，已有的肾上腺皮质激素类质量分析的文献中，没有关于肾上腺皮质激素类药的有关物质方面提取的文献。有关物质测定的浓度一般是含量测定的10-100倍，故有关物质测定比含量测定要求更严，要求基线噪音对杂质测定无干扰，就对样品前处理提出了更高的要求。已有的文献中只是将样品中的主药溶解，进行含量测定，不太在意溶解的基质对测定的影响。故采用现有含量测定时提取肾上腺皮质激素类成分的方法，提取其降解物后进行有关物质的测试，测试效果不理想，噪音多、干扰多，导致测试不稳定、不准确。

基于上述原因，本发明探索了一种针对含肾上腺皮质激素成分的组合物进行有效肾上腺皮质激素成分提取，并利于后述测试的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种从组合物中提取具有孕甾烷母核结构的化合物的方法，该方法通用性广，能有效提取该类化合物并且不会对其产生破坏，所用的溶剂也不会干扰后续的分析检测。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：