[发明专利]一种豆渣蛋白质的提取方法及其用于制备DPP‑IV抑制肽的方法有效
| 申请号： | 201410455009.1 | 申请日： | 2014-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN104256047B | 公开（公告）日： | 2017-09-29 |
| 发明（设计）人： | 谢宁宁;黄晶晶;程江华;王灼琛;余丽;王晓莉;王苗苗;李迪龙;赵友成;殷俊峰;闫晓明 | 申请（专利权）人： | 安徽省农业科学院农产品加工研究所 |
| 主分类号： | A23J1/14 | 分类号： | A23J1/14;C12P21/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 豆渣 蛋白质 提取 方法 及其 用于 制备 dpp iv 抑制 | ||
1.豆渣蛋白质用于制备DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于，按如下步骤进行：
(1)按料液比为1∶20～1∶200向豆渣蛋白质中加入水，调节pH值至1.5～10.0；
(2)按蛋白酶与加水之前的豆渣蛋白质比为1∶200～1∶20再加入蛋白酶，调节温度至20～60℃，进行水解反应0.5～6h，水解反应结束后，灭酶得到水解液；
(3)将水解液离心去除残渣，获得的上清液经干燥制得DPP-IV抑制肽粗品粉末；
(4)将DPP-IV抑制肽粗品粉末配成浓度为20-200mg/ml的溶液，然后经过膜分离或柱层析进行进一步的纯化得到DPP-IV抑制肽纯品；
所述豆渣蛋白的提取方法按如下步骤进行：
a)将新鲜的豆渣按照料液比为1∶10～1∶100加入水，搅拌均匀；
b)将豆渣液放置于30-50℃温度条件下，放置时间1.0～24h，在此过程中豆渣液的pH值不断降低，待pH值为3.0-5.0时，将豆渣液取出，室温下冷却降温，此时豆渣液分成三层，最上层为浅黄色漂浮物，中间层为水，最下层为析出的浅黄色蛋白质，采用玻璃容器将最上层的黄色漂浮物弃去；
c)采用2-12层120目以上纱布过滤，除去水，收集纱布上残留的豆渣蛋白质，将豆渣蛋白质放置于室温自然晾干。
2.根据权利要求1所述的豆渣蛋白质用于制备DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于：所述的步骤(2)中所述的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合风味蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶中的一种或多种的复配。
3.根据权利要求1所述的豆渣蛋白质用于制备DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于：所述的步骤(3)中干燥方式为冷冻干燥、真空干燥或喷雾干燥。
4.根据权利要求1所述的豆渣蛋白质用于制备DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于：所述的步骤(4)中膜分离采用的膜孔径有10kDa、5kDa和3kDa，柱层析填料有：SP-葡聚糖凝胶C-25，CM-葡聚糖凝胶C-25，葡聚糖凝胶G-25，葡聚糖凝胶G-15，葡聚糖凝胶G-10；当采用葡聚糖凝胶G-25，葡聚糖凝胶G-15和葡聚糖凝胶G-10时，DPP-IV抑制肽粗品粉末需要用水溶解；当采用SP-葡聚糖凝胶C-25和CM-葡聚糖凝胶C-25，DPP-IV抑制肽粗品粉末需要用乙酸缓冲液溶解。
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