[发明专利]牛奶中人α-乳清蛋白筛查试纸条及制备方法与应用有效
申请号: | 201410441846.9 | 申请日: | 2014-09-01 |
公开(公告)号: | CN104267189A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 刘榜;陶晨雨;石德时;张庆德 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 张红兵 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 牛奶 中人 蛋白 试纸 制备 方法 应用 | ||
1.一种转基因牛奶中人α-乳清蛋白免疫胶体金筛查试纸条,包括样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸和塑料衬板,其特征在于,在所述的塑料衬板上依次搭接粘帖有样品垫、金标垫、层析膜和吸水纸;所述的金标垫上包被有抗人α-乳清蛋白单克隆抗体,分泌抗人α-乳清蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株LB-001,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:C2014157;所述的层析膜上分别包被有人α-乳清蛋白的检测线即T线和山羊抗兔IgG的质控线,即C线。
2.一种牛奶中人α-乳清蛋白免疫胶体金筛查试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)用柠檬酸钠与氯金酸反应制备得到胶体金;
(2)将保藏号为CCTCC NO:C2014157的杂交瘤细胞株LB-001分泌的抗人α-乳清蛋白单克隆抗体加入到步骤(1)制备的胶体金中,得到抗人α-乳清蛋白单克隆抗体-胶体金标记物;
(3)将抗人α-乳清蛋白单克隆抗体-胶体金标记物包被到金标垫上;
(4)将人α-乳清蛋白标准品包被到层析膜上构成检测线,即T线,并将山羊抗兔IgG包被到层析膜上构成质控线,即C线;
(5)在塑料衬板上依次搭接粘帖样品垫、金标垫、层析膜及吸水纸,得到转基因牛奶中人α-乳清蛋白的免疫胶体金筛查试纸条。
3.权利要求1所述的试纸条在筛查转人α-乳清蛋白基因牛奶检测中的应用。
4.一株分泌抗人α-乳清蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株LB-001,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:C2014157。
5.权利要求4所述的杂交瘤细胞株LB-001分泌的抗人α-乳清蛋白单克隆抗体在制备转基因牛奶中人α-乳清蛋白免疫胶体金筛查试纸条中的应用。
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