[发明专利]谷糠内壳结合态多酚及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及植物多酚的制备和应用，具体属于一种谷糠结合态多酚及其制备方法，以及在制备抗肿瘤药物和保健食品中的应用。 

背景技术

谷子(学名：Setaria italica)：属禾本科的一种植物，去皮后俗称小米。广泛栽培于欧亚大陆的温带和热带，中国黄河中上游为主要栽培区，其他地区也有少量栽种。谷糠是在谷子经垄谷脱壳，碾米等加工成为精米过程中得到的副产品。谷子变成糙米脱去的第一层壳为谷糠外壳，进一步糙米除去麸皮成为精米，其中麸皮就是谷糠内壳。 

中医经典《黄帝内经》认为“谷气通于脾”，谷糠昧甘、性平、偏于补气，具有益气健脾、养血安神、补肾健脑的功效，适合于气血不足、脾肾偏亏的失眠患者的食补与治疗之用。目前已有文献表明：谷糠中含有大量的营养组分和具有抗氧化活性的生物活性分子，如：多酚，多糖以及一些活性蛋白及多肽等。因此，谷糠可以作为一种药食同源的保健食品。 

谷子酚类物质主要以自由态和结合态两种形式存在，其中包括对羟基苯甲酸和羟基肉桂酸衍生物，此外还有一些黄酮类物质。有研究表明，谷子多酚物质具有抗氧化活性，还有抑菌、消炎、降血脂、降血糖、降胆固醇、增强免疫力和肾保护功能，但尚未看到谷糠多酚抗肿瘤活性研究。本实验以谷糠内壳为材料，提取出一种具有抗肿瘤活性的结合态多酚，该多酚能够显著抑制多种肿瘤细胞的增殖。因此，本发明不仅能够应用于抗肿瘤药物和保健品的开发，同时促进谷糠的深度开发和有效利用。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的谷糠内壳结合态多酚及其制备方法，以及其在制备抗肿瘤药物和保健食品中的应用。 

本发明提供的一种谷糠内壳结合态多酚，通过包括如下步骤的方法制得： 

第一步：取谷糠内壳，充分粉碎后，加入预冷的丙酮，4℃下均匀搅拌10-30分钟，3,000rpm离心5min后去上清液，留残渣；离心后的残渣可重复提取1-2次； 

所述丙酮的浓度为80％；所述的谷糠和丙酮重量体积比(g/mL)为1︰25-30； 

第二步：在收集的残渣中加入NaOH(2mol/L)溶液消化，在室温下充分搅拌至少1小时，再在混合物料中加入HCl使溶液pH为7，终止消化； 

所述的谷糠残渣和NaOH溶液重量体积比(g/mL)为1︰5-15； 

第三步：终止消化后继续加入与NaOH溶液等体积的正己烷，搅拌混匀，静置萃取至少10分钟，除去脂质；然后3,500rpm离心5分钟，收集除脂质之外的液体，收集的清液可重复萃取1-2次； 

第四步：将第三步得到的清液用等体积的乙酸乙酯提取至少10分钟，3,500rpm离心5分钟，除去剩余脂质，收集液体，重复操作3-5次； 

第五步：将上述提取液在45℃旋转蒸发至溶剂尽，真空冷冻干燥成粉末即得纯多酚样品，命名为BPIS于-20℃保存。 

经体外抗肿瘤活性检测显示，该谷糠多酚可明显抑制多种癌细胞增殖，具有良好的广谱抗癌活性。结果显示用一定浓度该多酚处理人肝癌细胞(HepG2)、人宫颈癌细胞(Hela)、人结肠癌细胞(HCT-116)24小时，平均致死率约为50％以上，所以该多酚对人肝癌细胞(HepG2)、人结肠癌细胞(HCT-116)和人宫颈癌细胞(Hela)具有较好的抑制效果。 

该方法制备的结合态多酚，因其来源于纯天然谷物，加之纯化工艺简单，因此有较大的开发前景和应用价值。如：在医药方面，可制备具有抗肿瘤活性的小分子药物；在保健品方面，可制备具有抗肿瘤和抗氧化功能的保健口服液；另外，还可以作为天然食品添加剂应用在糖果、饮料中，还可作为辅料添加在化妆品中。 

附图说明

图1谷糠内壳结合态多酚(BPIS)样品 

图2谷糠内壳结合态多酚(BPIS)对细胞毒性的影响 

图3癌细胞经谷糠内壳结合态多酚(BPIS)处理后形态变化图(×20) 

图4谷糠内壳结合态多酚(BPIS)诱导Hela、HepG2、HCT-116细胞凋亡具有剂量依赖性柱形图 

具体实施方式

实施例1 

谷糠内壳结合态多酚(BPIS)的制备方法，步骤为： 

(1)将天然谷子去皮的谷糠内壳烘干，粉碎。 

(2)取谷糠内壳粉末2g，加入预冷的80％的-20℃预冷丙酮50mL搅拌10分钟混匀，然后将混合物料3,000rpm、离心5分钟，收集除脂质的液体，4℃下均匀搅拌，留残渣；离心后的残渣可重复提取1-2次；