[发明专利]一种HPLC检测胱氨酸中酪氨酸含量的方法有效
| 申请号： | 201410439427.1 | 申请日： | 2014-09-01 |
| 公开（公告）号： | CN104181251A | 公开（公告）日： | 2014-12-03 |
| 发明（设计）人： | 郭刚;程文莹;鲁家云;袁涛;涂静;曾庆国 | 申请（专利权）人： | 湖北新生源生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 荆州市技经专利事务所 42219 | 代理人： | 韩志刚;陈江桥 |
| 地址： | 434300 湖北省荆*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 hplc 检测 胱氨酸 酪氨酸 含量 方法 | ||
1.一种HPLC检测胱氨酸中酪氨酸含量的方法，其特征在于：所述的方法选用InertSustain C18 ，4.6×250mm，5μm色谱柱，流动相中水相—乙腈比例为90-97:10-3，水相用高氯酸调节pH值为2.0，流速：1.0ml/min，柱温：25-35℃，检测波长：225-235nm，进样体积：10-50μl。
2.根据权利要求1所述的HPLC检测胱氨酸中酪氨酸含量的方法，其特征在于：所述的方法具体操作步骤如下：
（1）配制酪氨酸对照品溶液：取酪氨酸对照品25mg放入25mL的量瓶中，加入浓度为0.5mol/L的盐酸溶液，超声波处理使25mg酪氨酸对照品完全溶解并定容至25mL刻度，摇匀，取0.5mL所配制的酪氨酸对照品盐酸溶液加入到50mL量瓶中，用浓度为0.1mol/L盐酸溶液稀释至50mL刻度，摇匀，配制成10mg/mL的酪氨酸对照品溶液；
（2）配制胱氨酸样品溶液：取25-50mg胱氨酸样品放入25mL量瓶中，加入浓度为0.5mol/L盐酸溶液5mL，超声波处理使胱氨酸样品完全溶解，再用浓度为0.1mol/L的盐酸溶液稀释至25mL刻度，摇匀，配制成1-2mg/mL的胱氨酸样品溶液；
（3）设置流动相流速为1.0mL/min，检测波长为225-235nm，柱温为25-35℃；
（4）分别取步骤（1）或步骤（2）配制好的溶液10-50μL，分别注入高效液相色谱仪中，进行色谱分析，并记录色谱图。
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