[发明专利]一种转录激活子样效应因子核酸酶及其编码基因和应用

权利要求书

1.一对蛋白质，其特征在于，所述一对蛋白质由一对多肽两端分别加上转录激活子样效应因子氨基酸序列框架的天然或经过人工改造的N端和C端组成；

所述一对多肽分别具有如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列，或分别具有如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列；

所述一对蛋白质分别具有如SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列，或分别具有如SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列。

2.一对多核苷酸，其特征在于，所述一对多核苷酸分别编码如权利要求1所述的一对蛋白质。

3.根据权利要求2所述的一对多核苷酸，其特征在于，优选地，所述一对多核苷酸分别具有如SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14所示的碱基序列，或分别具有如SEQ ID NO：15和SEQID NO：16所示的碱基序列。

4.一对融合蛋白，其特征在于，所述一对融合蛋白由权利要求1所述的一对蛋白质分别与DNA切割蛋白融合而成；

所述DNA切割蛋白为天然的或经过人工改造的Fok1DNA内切酶；

所述一对融合蛋白分别具有如SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18所示的氨基酸序列，或分别具有如SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20所示的氨基酸序列。

5.一对多核苷酸，其特征在于，所述一对多核苷酸分别编码如权利要求4所述的一对融合蛋白。

6.根据权利要求5所述的一对多核苷酸，其特征在于，所述一对多核苷酸分别具有如SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22所示的碱基序列，或分别具有如SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24所示的碱基序列。

7.一对重组载体，其特征在于，所述一对重组载体分别包含如权利要求2、3、5或6中任一项所述的一对多核苷酸。

8.根据权利要求7所述的一对重组载体，其特征在于，所述一对重组载体以pCDNA3.1(-)或pTAL3为载体骨架构建而成。

9.一种如权利要求1所述的一对蛋白质、如权利要求2或3所述的一对多核苷酸、如权利要求4所述的一对融合蛋白、如权利要求5或6所述的一对多核苷酸或者如权利要求7或8所述的一对重组载体在对小鼠PPARγ2基因靶向修饰中的非诊断治疗目的的应用。

10.一种非诊断治疗目的的小鼠PPARγ2基因靶向修饰的方法，其特征在于，所述方法包括：将如权利要求4所述的一对融合蛋白、如权利要求5或6所述的一对多核苷酸或者如权利要求7或8所述的一对重组载体转入小鼠细胞，在适于所述细胞的条件下培养，得到PPARγ2基因被靶向修饰的细胞。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：所述小鼠细胞为成纤维细胞。

12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：所述小鼠细胞为小鼠3T3-L1细胞。