[发明专利]miRNA-26a的用途有效
| 申请号： | 201410409332.5 | 申请日： | 2014-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN104152566A | 公开（公告）日： | 2014-11-19 |
| 发明（设计）人： | 肖文华;王硕;屈雪玲;李小梅;董伟伟;赵慧霞 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院第一附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 丛芳 |
| 地址： | 100048*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | mirna 26 用途 | ||
1.一种与人类肝癌相关的血液miRNA标志物，其特征在于，所述miRNA标志物是exosome来源的miRNA-26a，其序列信息如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述的miRNA标志物的检测试剂，其特征在于，所述试剂包括QPCR实验中使用的反转录引物和/或扩增引物；所述反转录引物为Oligo(dT)特异性的RT引物；所述扩增引物的上游引物序列如SEQ ID NO.2所示，所述扩增引物的下游引物为通用反向引物。
3.权利要求1所述的miRNA标志物在制备人类肝癌诊断试剂盒中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求2所述的试剂。
5.权利要求2所述的试剂在制备人类肝癌诊断试剂盒中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求2所述的试剂。
7.一种人类肝癌诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒包含权利要求2所述的试剂。
8.根据权利要求7所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包含PCR反应常用的试剂和酶。
9.一种检测权利要求1所述的miRNA标志物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)分离纯化血液中肿瘤源性的exosome；
(2)提取样本总RNA；
(3)将步骤(2)获得的RNA逆转录成cDNA；
(4)在荧光实时定量PCR仪上将步骤(3)获得的cDNA和参照基因进行扩增检测；
(5)通过融解曲线分析和电泳确定目的条带，ΔΔCT法进行相对定量。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述RNA逆转录成cDNA使用的引物序列为Oligo(dT)特异性的RT引物；所述cDNA扩增引物的上游引物序列如SEQ ID NO.2所示，所述cDNA扩增引物的下游引物为通用反向引物。
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