[发明专利]一种海洋细菌可湿性粉剂的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种海洋细菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于，其步骤如下：

（1）海洋细菌GM-1菌株种子液的制备：将活化的海洋细菌GM-1菌株斜面菌种用2ml无菌水清洗下，配制成浓度为10⁹cfu/ml的菌悬液,接入到装有50mlPD培养基的250ml三角瓶中，28℃、180r/min摇床培养24h，即得种子液，调整浓度为10⁹个细胞/mL作为种子液；

（2）发酵：用50L发酵罐对海洋细菌GM-1菌株进行发酵，制备海洋细菌GM-1菌株发酵液；发酵条件：装液量为30L，接种量7%，种子液菌龄24h、浓度10⁹cfu/ml，温度28℃，搅拌速度200r/min，通气量3L/min，发酵时间36h；生物量达2.40×10¹⁰cfu/mL；得GM-1菌株发酵液；

（3）成品粉剂制备：按饱和吸附量向发酵好的GM-1菌株发酵液中加入载体硅藻土，每间隔1h搅拌一次，使载体充分吸附菌体，48h后GM-1菌体形成芽孢后，离心，沉淀置于60℃电热恒温鼓风干燥箱中烘干，即制得海洋细菌GM-1菌粉；最后将菌粉与稳定剂硬脂酸钙、分散剂聚乙烯醇、湿润剂十二烷基苯磺酸钠按重量比75：15：6：4进行混合，气流粉碎机粉碎，过300目筛，制备得到海洋细菌GM-1菌株可湿性粉剂。

2.权利要求1所述的制备方法所制得的可湿性粉剂对植物病原真菌的毒力测定方法，其特征在于，其步骤如下：将制备得到的GM-1菌株可湿性粉剂加入到装有70mL PDA培养基的250ml的三角瓶中，混合均匀，制成浓度不同的含药平板，每个三角瓶为一个浓度，平均倒入3个培养皿中，为3个重复；打取直径为5mm的供试水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solanii)，核盘菌（Sclerotinio sclerotiorum），黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum），菠菜早疫病菌（Alternaria solania）4种植物病原真菌菌苔，放入不同的含药平板中央，28℃下培养5d；以不加粉剂为对照，用十字交叉法测量菌落直径，计算不同浓度的GM-1菌株可湿性粉剂粉剂对不同病原真菌的抑制率，查询抑制率几率值，以粉剂浓度的对数为横坐标，抑制率的机率值为纵坐标，建立GM-1可湿性粉剂对4种植物病原真菌的毒力回归方程，计算的EC₅₀和EC₉₀。

3.权利要求1或2所述的制备方法制得的海洋细菌可湿性粉剂作为防治水稻纹枯病农药的用途。