[发明专利]一种Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法

说明书

技术领域

本发明属于化学合成领域，涉及一种中间体的合成方法，具体是涉及一种Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法。

背景技术

目前合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的路线如下：                                                

a.6-氯鸟嘌呤于DMF中加入碳酸钾，滴入溴乙酸苄酯，反应后过滤，滤液倒水中，加入浓盐酸调pH为3-4，得到产品Ga。

b.在-5℃THF中，将Ga溶液其中，加入三光气搅拌，然后滴入DIEA，和固体二苯甲醇后室温过夜反应，然后加入甲醇，除去溶解，油状物溶解，重结晶得到Gb。

c.把NaH于THF中，溶液冷却到-30℃，然后滴入3-羟基丙腈，然后在0℃下搅拌反应，然后加入Gb，反应液室温过夜，用柠檬酸溶液调pH为3-4，过滤得到粗品，然后在甲醇中重结晶，旋干纯产品Gc。     

d.将Gc溶于干燥的DMF中，加入NMM，温度降到-20℃，滴加特戊酰氯，原料消失，加入N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯盐酸盐溶解，搅拌反应2h，倒入水中，固体析出，过滤出固体即为产品Gd。

e.将Gd于乙腈中冷却-30℃，滴加2M LiOH溶液，直到反应完全，用柠檬酸溶液调节pH为3-4，得到粗固体，用二氯甲烷：甲醇10:1硅胶柱（200-300目）得到纯度为95%的产品Ge。

  该工艺在d步骤中，对试剂及溶剂的无水要求较高，水分会降低的转化率，而且反应需要低温反应，成本较高，不宜放大反应。

 

发明内容

要解决的技术问题：常规的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法中对试剂和溶剂的无水要求较高，水分会降低的转化率，而且反应需要低温反应，成本较高，不宜放大反应。最终制备得到的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的纯度较低，只有95%左右。

 技术方案：针对上述问题，本发明公开了一种Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，解决原类似合成方法存在的操作难，产率低，成本高、不宜放大生产的技术问题。

本发明的一种合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，包括以下步骤：

   步骤1）6-氯鸟嘌呤于DMF中加入碳酸钾，加热溶解，然后冷却溶液至-5℃，滴入溴乙酸苄酯，然后室温搅拌过夜，然后过滤，滤液倒水中，加入浓盐酸调pH为酸性，搅拌过滤产品，水洗，重结晶，旋干纯产品Ga。

步骤2）把Ga加入到-5℃的THF中，加入三光气搅拌，然后滴入DIEA，再加入二苯甲醇后室温过夜反应，然后加入乙醇，旋干溶液，然后用DCM溶解，用柠檬酸溶液洗，然后再用碳酸氢钠溶调pH为3得到粗产品，重结晶得到Gb。

步骤3）把NaH于THF中，溶液冷却到-30℃，然后滴入3-羟基丙腈，然后在0℃下搅拌反应，然后加入Gb，反应液室温过夜，用柠檬酸溶液调pH为3-4，过滤得到粗品，然后在甲醇中重结晶，旋干纯产品Gc。     

步骤4）将Gc、HBTU和N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯盐酸盐于DMF中，搅拌均匀后，滴加NMM，搅拌反应2h，倒入水中，得到产品Gd。

步骤5）将Gd于乙腈中冷却-30℃，滴加2M LiOH溶液，直到反应完全，用柠檬酸溶液调节pH为3-4，得到粗固体，二氯甲烷、甲醇硅胶柱（200-300目）得到99%纯度的产品Ge。

所述的一种合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，合成方法路线如下：

 

本发明中用到的试剂缩写表示如下：

Fmoc-osu：芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺

Me：甲基

HBTU:苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐

NMM：N-甲基吗啡啉

DMF:N,N-二甲基甲酰胺

THF:四氢呋喃

DIEA：N,N-二异丙基乙胺

有益效果：本发明的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法中反应试剂及溶剂不要求苛刻的无水，室温下转化率较高，降低了成本，操作简单，易于放大量的生产。并且最终合成得到的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH纯度达到95%，产率为75%。

 

具体实施方式

实施例1