[发明专利]一种产青蒿二烯的重组真核菌株及利用该重组真核菌株制备青蒿二烯的方法

权利要求书

1.一种产青蒿二烯的重组真核菌株，其特征在于，在所述真核菌株的基因组中整合表达3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因、表达FPP合酶的基因、和表达青蒿二烯合酶的基因；

上述三种基因以表达盒的形式整合到基因组中，表达盒包括基因、启动子和终止子；

所述整合为整合在所述基因组的多拷贝位点；

所述真核菌株为酿酒酵母CEN.PK2-1C；

所述多拷贝位点为Delta位点；

所述表达3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因来自于酿酒酵母BY4741基因组，为tHMGR基因；启动子为TEF1、TPI1或GPM1；终止子为TEF1、TPI1或GPM1；

所述表达FPP合酶的基因来自于酿酒酵母BY4741基因组，为ERG20基因；启动子为GPM1、TPI1、FBA1或GPD1；终止子为TPI1、TEF1、GPM1、FBA1或GPD1；

所述表达青蒿二烯合酶的基因为ADS基因；启动子为ENO2、PGK1、TEF2或PDC1，终止子为GPM1、ENO2、TPI1、TEF1、FBA1或GPD1。

2.利用权利要求1所述的重组真核菌株制备青蒿二烯的方法，其特征在于，包括：

取所述重组真核菌株，接种到发酵培养基中，经发酵培养、分离、收集青蒿二烯，即得。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，当所述真核菌株为亮氨酸、组氨酸和色氨酸缺陷型酿酒酵母时，所述发酵培养基为尿嘧啶缺陷SC培养基；

其包括：葡萄糖、YNB培养基、氨基酸混合物、亮氨酸、组氨酸、色氨酸；所述亮氨酸的浓度为0.8g/L～1.2g/L；所述组氨酸的浓度为0.16g/L～0.24g/L；所述色氨酸的浓度为0.16g/L～0.24g/L。