[发明专利]一种多肽提取与分离方法

权利要求书

1.一种多肽提取与分离方法，其特征在于具体步骤如下：

对于单一多肽的吸附与释放

(1.1)配置浓度为1×10^-2摩尔/升~1×10^-8摩尔/升的多肽的缓冲水溶液，控制缓冲水溶液pH值大于多肽的等电点pI，然后向所得溶液中加入吸附剂SiO₂@PEI，并进行紫外/可见光谱的时间检测，随着时间加长，吸光度越来越低，直到吸光度不发生变化，即认为达到了吸附平衡；

(1.2)将上述吸附了多肽的吸附剂SiO₂@PEI过滤，并采用新鲜的缓冲水溶液洗涤，所述缓冲水溶液与步骤(1.1)所述的缓冲水溶液的pH值相同，然后该吸附剂SiO₂@PEI所吸附的多肽用另一缓冲水溶液洗脱回收，所述另一缓冲水溶液pH值小于多肽的等电点pI，并继续进行紫外/可见光谱的时间检测，直到紫外/可见光吸收不发生变化；即认为达到了释放平衡；

对于特定多肽的提取与纯化

由于特定多肽具有确定的等电点pI, 因此先将吸附剂SiO₂@PEI加入到含有目标提取多肽和干扰多肽的缓冲水溶液中，控制缓冲水溶液中的pH值大于目标提取多肽的等电点pI；经过1~48小时孵化，将吸附剂SiO₂@PEI分离并在该pH值下采用新鲜的缓冲水溶液洗涤，该吸附剂SiO₂@PEI所吸附的多肽以另一pH值低于pI的缓冲水溶液洗脱回收，该过程采用高效液相色谱或基质辅助激光解吸/离子化时间谱进行检测；基于等电点差异的提取方法通过切换pH值即可提取各类目标多肽，完全满足常规的分离要求，洗脱后的吸附剂可再利用。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述二氧化硅至少有一维尺寸在150微米以上。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述目标提取多肽与干扰多肽中的任意一种多肽的浓度不低于或等于1×10^-6摩尔/升时，采用高效液相色谱进行检测。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述目标提取多肽与干扰多肽中的任意一种多肽的浓度不低于或等于1×10^-15摩尔/升时，采用基质辅助激光解吸/离子化时间谱进行检测。