[发明专利]一株产洛伐他汀的紫红曲霉突变菌株及其诱变和筛选方法

权利要求书

1.一株产洛伐他汀的紫红曲霉突变菌株，其命名为红曲霉Monascus sp.，保藏编号为CGMCC No.9230。 

2.根据权利要求1所述的一株产洛伐他汀的紫红曲霉突变菌株，其特征在于，在麦芽汁琼脂培养平板上，其菌株的形态特征为：菌落表面绒毛状，平坦，边缘完整；菌丝体最初呈白色，随菌落的生长、发育而变化，逐渐呈现橘色至橘红色；背面边缘浅褐色，中央渐呈褐色；该菌株的生理生化特点为：生长温度范围比出发菌株更广，耐高温，45℃仍可正常生长，最适生长温度为25-30℃；生长的最适pH值3.5-5，可耐浓度高达10％的乙醇，耐高渗透压，在甘油含量25％的平板上仍可正常生长。 

3.一种权利要求1或2中产洛伐他汀紫红曲霉突变菌株的诱变方法，其特征在于，是先采用地面模拟诱变，然后进行空间诱变的的联合诱变方法。 

4.根据权利要求3所述的产洛伐他汀紫红曲霉突变菌株的诱变方法，其特征在于，所述地面模拟诱变按如下步骤进行： 

(1)将出发菌株接种在含有固体培养基的平板上进行培养，当菌株长满整个平板后待用； 

(2)对平板上的菌株进行以下一组或几组筛选试验，筛选出生长速度更快、颜色加深的菌株： 

a)振动试验：将长满菌株的平板固定在双振动台上，在0-400kN下振动1h，其中前0.5小时为低频正弦振动试验，后0.5小时为随机振动试验； 

b)真空低能粒子辐照试验：将长满菌株的平板放入空间低能综合辐照实验设备中，在10^-3-10^-6Pa真空度下辐照30-180分钟后回收，辐射剂量为1×10¹⁴eV—4×10¹⁴eV。 

5.根据权利要求3所述的产洛伐他汀紫红曲霉突变菌株的诱变方法，其特征在于，所述空间诱变是将地面模拟诱变中筛选出的菌株转移到搭载管中，置于太空舱内，然后将太空舱送入空间环境诱变，所述空间环境为：微重力10^-3-10^-6g，振动0-400kN；真空度10^-3-10^-6Pa，太空舱内辐射剂量0.1-0.9mGy。 

6.一种权利要求1或2中产洛伐他汀紫红曲霉突变菌株的筛选方法，其特征在于，依次按如下步骤进行： 

(1)在市售的麦芽琼脂培养基中加入红曲产洛伐他汀的代谢抑制剂，组成筛选培养基； 

(2)将筛选培养基灭菌并倒在直径为90mm的平板中，冷凝后就可用于筛选高产洛伐他汀的菌株； 

(3)将经地面模拟空间诱变与空间诱变过的菌株、或在生产中长期使用发生退化变异的菌株均匀涂布在筛选平板上； 

(4)常规培养，依照生产速度、菌落大小筛选生长较快、菌落形态变化较大、颜色较深的菌株作为备选菌株，进入发酵流程，最终依靠菌株产洛伐他汀的含量确定高产菌株。 

7.根据权利要求6所述产洛伐他汀红曲霉突变菌株的筛选方法，其特征在于，所述红曲产洛伐他汀的代谢抑制剂为乙酰辅酶A、二氢莫纳可林(DihydromonacolinL)、莫纳可林L(monacolinL)、莫纳可林J(monacolin J)和莫纳可林K(monacolin K)其中的一种或几种的混合物。 

8.根据权利要求7所述产洛伐他汀红曲霉突变菌株的筛选方法，其特征在于，所述代谢抑制剂的混合浓度为10^-6g/L——10^-1g/L。