[发明专利]液相色谱串联质谱法测定香精香料中香叶醇的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测技术领域，涉及香叶醇的测定方法，具体地说是一种通过液相色谱-串联质谱法快速测定香精香料中香叶醇的方法。

背景技术

香叶醇(Geraniol，反-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇)别名牻牛儿醇、香天竺蔡醇，是一种单萜烯醇，天然存在于玫瑰草油(含量80％左右)、香叶油、茉莉油等250多种植物中，具有类似玫瑰花香，是香料的常用主香剂，广泛应用于药物、烟草、食品配料等领域。在卷烟香味中起到重要的作用，是最为常见的烟用香料，可以增加卷烟的玫瑰香气、甜香，过多则会产生皂香和花香。

目前，对香叶醇的检测方法主要是气质联用法(GC-MS)。但香精香料样品成分复杂，用气质联用法(GC-MS)将目标物和干扰物基线分离需要较长的分析时间，且前处理步骤繁琐。

近年来，随着液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)技术的发展，LC-MS/MS技术在化合物分析中得到广泛的应用。液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)分析技术无论在灵敏度上还是选择性上都具有明显的优势，且分析时间较短。检测香精香料中香叶醇的LC-MS/MS方法未见报导。

发明内容

本发明的目的在于提供一种准确检测香精香料中香叶醇含量的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种香精香料中香叶醇的检测方法，该方法采用液相色谱串联质谱法测定，采用外标法定量。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中香叶醇的检测方法包括以下步骤：

(1)标准溶液的配制；称取香叶醇标准品，用甲醇配制成具有浓度梯度的香叶醇标准工作溶液；

(2)样品溶液的制备：使用甲醇萃取香精香料样品中的香叶醇，过滤后得到样品溶液；

(3)液相色谱-串联质谱分析：利用液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析；

(4)绘制标准曲线，计算烟用香精香料中香叶醇的含量。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中香叶醇的检测方法，其中所述的香精香料为烟用香精香料，优选地，所述的香精香料样品使用甲醇萃取样品中的香叶醇；优选地，萃取用的甲醇为浓度为8～12％(v/v)甲醇水溶液，更优选地，萃取用的甲醇为浓度为10％(v/v)甲醇水溶液。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中香叶醇的检测方法，其中萃取的方式为超声萃取。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中香叶醇的检测方法，其中步骤(2)所述的样品溶液的制备过程如下：称取适量待测香精香料样品，加入适量甲醇水溶液,室温下超声萃取，过滤后，得到样品溶液。优选的过滤方式采用微孔滤膜过滤，例如0.22μm有机滤膜或0.45μm有机滤膜。

在一个具体的实施方案中，所述香精香料样品的制备方法具体为：称取0.1g左右试样,置于25mL锥形瓶中；加入10％(v/v)甲醇水溶液10mL,室温下超声30min,用0.22μm有机滤膜过滤后直接进样。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中香叶醇的检测方法，其中液相色谱的分析条件为以下(i)至(vi)中的一项或多项：

(i)采用C18色谱柱，

优选地，所述的色谱柱的规格为50mm×2.1mm i.d.,2.6μm粒径，

(ii)色谱柱温度为28～32℃，优选为30℃，

(iii)进样量为8～12μL，优选为10μL，

(iv)流动相：乙腈-乙酸铵-乙酸-水溶液，

优选的流动相：A为乙腈，B为5mmoL/L乙酸铵溶液(其中含有0.1％(v/v)乙酸)，采用等度洗脱程序，体积比50：50，

(v)流速为0.1～0.3ml/min，优选为0.2ml/min，

(vi)洗脱时间约10min。

在一个优选的实施方案中，发明所述的香精香料中香叶醇的检测方法，其中质谱的分析条件为以下(i)至(iii)中的一项或多项：

(i)用电喷雾离子阱串联质谱测定香叶醇；

(ii)离子源：电喷雾电离源(ESI)；

(iii)以选择离子对定性，优选的离子对为：子离子73.1(m/z)，母离子155.3(m/z)。