[发明专利]液相色谱串联质谱法测定香精香料中香叶醇的方法

权利要求书

1.一种香精香料中香叶醇的检测方法，该方法采用液相色谱串联质谱法测定，采用外标法定量。

2.权利要求1的检测方法，包括以下步骤：

(1)标准溶液的配制；称取香叶醇标准品，用甲醇配制成具有浓度梯度的香叶醇标准工作溶液；

(2)样品溶液的制备：使用甲醇萃取香精香料样品中的香叶醇，过滤后得到样品溶液；

(3)液相色谱-串联质谱分析：利用液相色谱-串联质谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析；

(4)绘制标准曲线，计算烟用香精香料中香叶醇的含量。

3.权利要求2的检测方法，其中所述的香精香料为烟用香精香料，

优选地，所述的香精香料样品使用甲醇萃取样品中的香叶醇；

优选地，萃取用的甲醇为浓度为8～12％(v/v)甲醇水溶液，更优选地，萃取用的甲醇为浓度为10％(v/v)甲醇水溶液。

4.权利要求2的检测方法，其中萃取的方式为超声萃取。

5.权利要求2的检测方法，其中所述的香精香料样品的制备过程如下：称取适量待测香精香料样品，加入适量甲醇水溶液,室温下超声萃取,过滤后，得到样品溶液。

6.权利要求2的检测方法，其中液相色谱的分析条件为以下(i)至(vi)中的一项或多项：

(i)采用C18色谱柱，

优选地，所述的色谱柱的规格为50mm×2.1mm i.d.,2.6μm粒径，

(ii)色谱柱温度为28～32℃，优选为30℃，

(iii)进样量为8～12μL，优选为10μL，

(iv)流动相：乙腈-乙酸铵-乙酸-水溶液，

优选的流动相：A为乙腈，B为5mmoL/L乙酸铵溶液(含0.1％(v/v)乙酸)，采用等度洗脱程序，体积比50：50，

(v)流速为0.1～0.3ml/min，优选为0.2ml/min，

(vi)洗脱时间约10min。

7.权利要求2的检测方法，其中质谱的分析条件为以下(i)至(iii)中的一项或多项：

(i)用电喷雾离子阱串联质谱测定香叶醇，

(ii)离子源：电喷雾电离源(ESI)；

(iii)以选择离子对定性，优选的离子对为：定性离子对m/z 155.3>73.1，155.3>127.1，定量离子对m/z 155.3>73.1。

8.权利要求7的检测方法，其中质谱的分析条件为：扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测(MRM)；电喷雾电压：5500V；离子源温度：700℃；辅助气Gas1压力：60psi；辅助气Gas2压力：50psi；去簇电压(DP)：40V；碰撞能(CE):20V。

9.权利要求2或6的检测方法，其中色谱分析条件为：色谱柱采用菲罗门C₁₈液相色谱柱，色谱柱温度为30℃，进样量为10μL，流速为0.2ml/min；流动相：A为乙腈，B为5mmoL/L乙酸铵溶液(含0.1％乙酸)，采用等度洗脱程序，体积比50：50，洗脱时间总共约10min。

10.权利要求2的检测方法，其中外标法所用的标准溶液的配制步骤如下：称取0.1g香叶醇，精确至0.0001g，用甲醇溶解后转移至1000mL容量瓶中并定容，定为标准储备液；分别移取0.01mL，0.05mL，0.1mL，0.5mL，1.0mL的标准储备液到100mL容量瓶中，用浓度为10％(v/v)甲醇水溶液定容，则香叶醇的浓度为0.01μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL，得到香叶醇的系列标准溶液。