[发明专利]一种白及种子液体悬浮培养原球茎的方法有效
| 申请号： | 201410368387.6 | 申请日： | 2014-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN104137778A | 公开（公告）日： | 2014-11-12 |
| 发明（设计）人： | 周义峰;汤兴利;刘彦红;吴亚萍;王玫 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南京分院东台滩涂研究院;南京农业大学;江苏琵琶景观有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 裴咏萍 |
| 地址： | 224236 江苏省盐*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 白及 种子 液体 悬浮 培养 球茎 方法 | ||
1.一种白及种子液体悬浮培养原球茎的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）白及种子消毒；
（2）悬浮发芽培养：在无菌条件下，用剪刀剪开白及蒴果外壳，将种子抖落在液体发芽培养基中，进行震荡培养；所述液体发芽培养基采用1/2MS培养基；所述液体发芽培养基中含有NAA 0.5-1.0mg/L、蔗糖30g/L；所述培养条件为暗培养，培养温度24-26℃，培养时间为30天；
（3）悬浮壮苗培养：将经步骤（2）悬浮发芽培养后得到的白及原球茎转接于液体壮苗培养基中，进行震荡培养；所述液体壮苗培养基采用1/2MS培养基；所述液体壮苗培养基中含有NAA 1.0mg/L、6-BA 1.0mg/L、蔗糖30g/L；所述培养条件为光照培养，光照时间为16h/d，光照强度为2000-2500lx，培养温度为24-26℃，培养时间为30-45天。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中液体发芽培养基中NAA的含量为0.5mg/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中培养时间为30天。
4.根据权利要求1至3任一所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中对白及种子消毒采用以下方法：将白及蒴果表面清洗干净，用洗衣粉洗涤5-10min，置流水冲洗干净，再用75%酒精表面消毒5min，无菌水冲洗干净，然后用10%次氯酸钠溶液浸泡消毒白及蒴果，无菌水冲洗5-7遍。
5.根据权利要求1至3任一所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）悬浮壮苗培养后得到的白及原球茎转入设施育苗设备中进行炼苗或转接于固体培养基中进行生根培养。
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