[发明专利]一种同时提取并分离烟草绿原酸、茄尼醇、生物碱、芸香苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种烟草功能成分的综合提取及分离技术，尤其涉及一种同时提取并分离烟草绿原酸、茄尼醇、烟碱、芸香苷的方法。

背景技术

烟草的药用价值在我国历代本草和中医药文献中均有论述，现代分析化学已经证明了烟草中富含多种生物活性功能成分。烟草是最丰富的植物茄尼醇（1-4%）资源；烟草叶片绿原酸（0.2-5.4%）含量与金银花相当；烟草芸香苷（芦丁，最高达2%）含量与苦荞主要功能成分相当；烟草中的烟碱及其相关的物质非常有希望作为将来治疗阿尔茨海默氏病的候选药物。烟碱农药是一种传统的高效低毒 “绿色农药”。烟草中还含有蛋白质、氨基酸、苹果酸、多糖等有益活性成分。我国烟草资源丰富，适应性广，种植成本低，同时，卷烟行业大量的废次烟叶也为烟草功能成分开发利用提供了丰富的原料来源。

目前，国内外对烟草茄尼醇、烟碱及蛋白质的提取、纯化技术研究较多，尤其是茄尼醇、烟碱，其提取纯化技术已得到广泛开发和利用，烟草绿原酸的提取和利用也开始受到关注。但目前对于烟草功能成分的研究和利用主要以单一功能成分的提取利用技术为主，不同功能成分的综合提取技术虽然开始受到关注，主要是茄尼醇和烟碱的综合提取技术，烟草多种活性物质的综合提取技术研究还报道较少，江南大学艾心灵等研究报道了以95%乙醇超声波辅助同时提取烟草茄尼醇、绿原酸、生物碱的技术，提取率分别为82%、94%、95%，三种物质尤其是茄尼醇的提取效率较低，且试验所需的提取温度高达80℃，试验能耗较高。

可见，当前的技术多是单项或某几项提取，而且提取工艺不够理想或提取率不高，目前有关烟草同时高效提取绿原酸、茄尼醇、烟碱、芸香苷的综合提取，并实现茄尼醇、绿原酸、芸香苷、烟碱有效分离且操作简单，节约溶剂，减少能耗的技术还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，提供一种同时提取并分离烟草绿原酸、茄尼醇、烟碱、芸香苷的方法。该方法将烟草四种功能物质同时高效提取出来，并实现烟草茄尼醇、绿原酸、芸香苷、烟碱有效分离，不仅提高了烟草资源的利用率，而且操作简单，节约溶剂，减少能耗。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种同时提取并分离烟草绿原酸、茄尼醇、烟碱、芸香苷的方法，其步骤包括：

步骤一、同时提取：将烟草原料粉碎后，设定提取温度40～50℃，超声频率45 KHz，料液比10：1条件下，首先用80%乙醇提取一次，抽滤或离心后，残渣再分别用80%、95%的乙醇各提取一次；三次提取液合并，获得烟草绿原酸、茄尼醇、烟碱、芸香苷的粗提液，烟草绿原酸、茄尼醇、烟碱、芸香苷的提取率均达100%；

步骤二、分离：

分离茄尼醇：提取液减压浓缩，沉淀，过滤后得茄尼醇沉淀物，茄尼醇沉淀物用乙醇溶解，氢氧化钠皂化后，用石油醚或正己烷萃取，萃取液浓缩，获得烟草茄尼醇粗品；

分离绿原酸、芸香苷：向过滤掉茄尼醇沉淀物的提取液中加入1%的壳聚糖溶液絮凝除杂，过滤，调滤液pH值至2，室温放置过夜，过滤得芸香苷沉淀物，将芸香苷沉淀物用热水溶解、结晶，获芸香苷粗品；过滤芸香苷沉淀物后的滤液通过大孔吸附树脂，洗脱液洗脱，浓缩，获绿原酸粗品；

或过滤掉茄尼醇沉淀物的提取液调pH至酸性，加入乙酸乙酯为萃取剂，萃取液合并，浓缩，获得烟草绿原酸粗品；萃取绿原酸后的水相，室温放置过夜，过滤得芸香苷沉淀物，将芸香苷沉淀物用热水溶解、结晶，获芸香苷粗品；

分离烟碱：将分离茄尼醇、绿原酸、芸香苷后的提取液，在碱性条件下，应用石油醚或正己烷萃取烟碱，再通过反萃取，获得烟碱粗品。

进一步的，所述步骤一的提取时间为20min。

进一步的，所述步骤二中分离茄尼醇：将步骤一中获得的提取液50℃减压浓缩，至无醇味，回收乙醇，浓缩液冷却后迅速过滤，过滤后得茄尼醇沉淀物；茄尼醇沉淀物以20-40%乙醇溶液洗涤后，用无水乙醇溶解，加入30%氢氧化钠溶液,在40-50℃超声条件下皂化40min，皂化完成后，加入去离子水，正己烷萃取3次，萃取液合并，浓缩，获得茄尼醇粗品。

进一步的，所述步骤二中分离烟碱：将分离茄尼醇、绿原酸、芸香苷后的提取液调pH值至13，用正己烷萃取5次，正己烷与水相的比例为1：1，再用20-30%硫酸水溶液进行反萃取，浓缩获40%硫酸烟碱溶液。