[发明专利]一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物育种领域，具体涉及一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法。

背景技术

连翘属(Forsythia)植物均为早春观花落叶灌木，先叶或同叶开放，花黄色，钟状，花柱二型，蒴果(中国植物志，1992)。

19世纪，西方国家从东方引进连翘属植物，进行了广泛的选择育种，培育出一批品种，由于抗逆性强和早春花朵繁密，这些品种在温带地区获得广泛栽培应用(Rosati et al.，2007)。德国植物园发现自然杂交种金钟连翘(Forsythia×intermedia)，成为现代连翘品种的主要亲本，新品种大量出现(Wyman，1961)。连翘常规杂交和自然突变选择育种工程主要集中于美国、加拿大、波兰和德国等国家。主要目标性状集中在抗寒性(用卵叶连翘和东北连翘作为育种亲本)、株型和花部性状的改良等方面。

作为观赏植物，连翘属植物自身也存在一些不足，如：花期集中于4月到5月，群体花期仅25天左右；花色单一，仅有黄色系品种；花无香味等。传统的连翘属内杂交育种无法解决这些问题。六道木叶属翅果连翘(Abeliophyllum distichum)花白色或粉色，淡香(Suk-Pyo Hong&Mae-Ja Han，2002)，与连翘花色差异明显，与连翘亲缘关系相对较近。采用翅果连翘与连翘进行属间杂交，有望丰富连翘的花色、花期等性状。同时对探讨连翘与近缘属远缘杂交亲和性、基因交流机制具有重要的意义。

发明内容

针对目前连翘属植物花色单一、花期集中的现状，本发明的目的是提供一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法，以改良连翘属植物观赏特性。

本发明提供的一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法，具体步骤如下：

1)选长花柱的连翘属的连翘为母本，选短花柱的六道木叶属的翅果连翘为父本，进行属间人工杂交，收取杂交后的种子；

2)种植种子获得杂交后代材料，参照父本和母本进行形态学观察统计，并采用AFLP分子标记进行杂种鉴定，选取连翘属与六道木叶属属间杂种。

六道木叶属的翅果连翘为异型花柱，选取短花柱的植株作为本发明的母本。同样连翘属的连翘也为异型花柱，选取长花柱的植株作为本发明的父本。

其中，步骤1)所述属间人工杂交，包括如下步骤：

a采集短花柱的六道木叶属翅果连翘的鲜花粉；

b将长花柱的连翘属连翘去雄；

c将步骤a采集的花粉授粉到步骤b连翘属连翘的柱头上并套袋；

d种子发育成熟后采收。

其中，步骤c所述授粉的时间为上午11-12时，每天1次，重复3次。

其中，步骤c所述套袋，授粉后套硫酸纸袋，花柱萎蔫后换成网袋。

其中，步骤d所述采收，为待种子发育成熟后采摘、阴干。采收到的种子室温干燥条件保存。

其中，步骤2)所述种植种子，具体步骤如下：

种子采用100mg/L赤霉素浸种处理6h后，点播于装有泥炭的穴盘内，覆膜，置于温室，萌发后获得杂交后代材料。

其中，步骤2)所述进行形态学观察统计，为连续3年进行表型观察统计。

其中，步骤2)所述进行形态学观察统计，针对茎、叶、枝条、花的表型。

其中，步骤2)所述采用AFLP分子标记进行杂种鉴定，所用的引物对为：

E38/M47

上游引物E38：5’-gactgcgtaccaattcact-3’(如SEQ ID No.1所示)

下游引物M47：5’-gatgagtcctgagtaacaa-3’(如SEQ ID No.4所示)

E38/M55

上游引物E38：5’-gactgcgtaccaattcact-3’(如SEQ ID No.1所示)

下游引物M55：5’-gatgagtcctgagtaacga-3’(如SEQ ID No.7所示)

E40/M52

上游引物E40：5’-gactgcgtaccaattcagc-3’(如SEQ ID No.2所示)

下游引物M52：5’-gatgagtcctgagtaaccc-3’(如SEQ ID No.6所示)

和/或E44/M49

上游引物E44：5’-gactgcgtaccaattcatc-3’(如SEQ ID No.3所示)