[发明专利]柑桔中痕量农药残留的表面增强拉曼光谱快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及柑桔中痕量农药残留的快速筛查方法领域，特别是涉及柑桔中痕量农药残留的表面增强拉曼光谱快速筛查方法，属于果蔬农药快速检测技术领域。

背景技术

柑桔内含有丰富的黄酮类化合物、类胡萝卜素、维生素等营养物质，具有提高机体免疫力、抗氧化、抗衰老、降血糖等作用。柑桔是我国南方第一大水果，也是世界第一大水果，在世界农业经济中占据十分重要的位置。目前，农药防治仍是最方便、最有效、最经济的柑桔病虫草害防治方法，而农药的不规范使用导致柑桔中存在严重的农药超标现象。

目前，柑桔中农药残留检测方法主要有气相色谱法、气相色谱质谱联用法、液相色谱法、液相色谱质谱联用法、酶联免疫法、生物传感器法等，前4种方法检测时间长、检测费用高，酶联免疫法、生物传感器法具有操作简便、快速等特点，但也存在一些缺陷，如酶抑制法容易出现假阳性和假阴性结果，生物传感器法也存在结果的稳定性差、精密度低和使用寿命短等问题。

拉曼光谱是一种分子散射光谱，携带的是分子结构信息，每一种物质都有其对应的“指纹”信息，据此可对物质的结构和成分进行表征，已广泛用于分子结构分析和分子鉴别，具有检测速度快、分辨率高、受水干扰小等优点。而拉曼散射强度很弱，灵敏度低，有时会淹没于分子的荧光信号中。但采用表面增强拉曼散射(Surface Enhanced Raman Scattering，SERS)等增强技术使其检测灵敏度能提高4-10个数量级，在单个分子探测、痕量物质检测方面具有较大的应用潜力。近年来，研究者们将表面增强拉曼光谱技术应用于食品、农产品中农药残留检测中。如申请号201110229459.5、名称为“一种蔬菜中甲胺磷的表面增强拉曼光谱快速筛查方法”的专利申请，采用极性溶剂提取蔬菜中的甲胺磷农药，以银溶胶为增强基底，绘制以甲胺磷浓度为横坐标，特征峰峰高为纵坐标的标准曲线，建立了蔬菜中甲胺膦农药残留的快速筛查方法。申请号201310428126.4、名称为“一种水果农药残留的表面增强拉曼光谱检测方法”的专利申请，采用丙酮为溶剂提取果皮中的农药，利用Fe₃O₄和C₁₈吸附剂来吸附提取液中的农药，采用丙酮、乙酸乙酯漂洗Fe₃O₄和C₁₈吸附剂后，再用二氯甲烷从吸附剂Fe₃O₄和C₁₈中洗涤出农药，用于拉曼光谱检测。李永玉(食品安全质量检测学报，2012年第6期，P672-675)公开了利用激光显微拉曼光谱技术无损检测苹果表面敌百虫农药残留方法，该方法检测限为4800mg/kg。刘文涵(光谱实验室，2012年第4期，P2059-2062)公开了利用激光拉曼光谱技术检测蔬菜红辣椒表面的甲基毒死蜱。刘燕德(中国农机化学报，2014年第1期，P88-91)公开了利用共焦显微拉曼光谱技术分析脐橙表皮的乐果农药残留，建立了脐橙表皮乐果农药残留的预测模型。国家标准规定，农产品中农药残留最低检测限达到mg/kg级甚至达到μg/kg级。表面增强拉曼光谱检测技术理论上能达到单分子检测，但柑桔类等水果中含有大量有机酸、色素、胶质和纤维素等大分子物质，这些物质容易产生荧光，且不同农产品基质成分不同，对农药分子的SERS检测产生的干扰也不同；另外，农产品中使用的农药种类较多，拉曼增强效应差异较大，导致SERS方法检测农产品中痕量农药残留的精密度和重现性较差。上述公开的方法使用表面增强拉曼光谱技术能达到对水果中农药分子信号增强的目的，但并未去除基质物质的影响，方法的检测限有待进一步提高，方法的准确性、稳定性较差，不能达到水果中痕量农药残留快速检测的目的。另外，上述公开的水果中农药残留检测方法的精密度和重现性也未进一步验证。

发明内容

本发明的目的是为了克服桔柑类等水果中有机酸、色素、胶质等基质对水果中痕量农药残留的表面增强拉曼光谱检测的影响，提供一种柑桔类农产品中痕量农药残留的表面增强拉曼光谱快速检测方法，以提高柑桔类农产品中农药残留的检测限。

为达到上述目的，本发明柑桔中痕量农药残留的表面增强拉曼光谱快速检测方法，按照下述步骤进行：

(1)银纳米或金纳米增强基底的制备：采用柠檬酸三钠加热还原法制备得到。

(2)建立各种农药标准品的表面增强拉曼谱图，并对其谱峰进行归属和解析。

(3)待测柑桔样品经捣碎后，萃取出样品溶液，萃取液为黄色。