[发明专利]一种功能性白芸豆多肽及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及白芸豆深加工，具体涉及功能性白芸豆多肽及其制备方法，以及该功能性白芸豆多肽在制备减肥和降血脂保健食品中的应用。

背景技术

白芸豆，生物学名菜豆，芸豆是一种高钾低钠食品，很适合于心脏病、动脉硬化和忌盐患者食用。白芸豆中蛋白质含量19.9％～20.0％，脂肪含量1.6％～2.1％，碳水化合物含量37.6％～48.5％，Ca、Fe含量分别是鸡肉的7倍和4倍，营养价值较高。目前关于芸豆多肽的研究有王永刚等人的《芸豆蛋白酶解工艺的研究》，该研究采用碱性蛋白酶制备出一种芸豆抗氧化活性肽。王秋明的《白芸豆多肽和氨基酸鲜味剂的研制》研究比较了以生熟豆渣用植物蛋白水解专用酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白水解复合酶和碱性蛋白酶制备多肽和氨基酸的产量和口感。近年来的研究表明，白芸豆蛋白质中含有一种天然的α-淀粉酶抑制剂，其分子量为36kDa左右，可以用于治疗肥胖症和糖尿病等，如杨明琰的《白芸豆中α-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提取纯化、组成结构及生物活性研究》和陈一昆等人的《芸豆提取物α-淀粉酶抑制剂对SD大鼠的减肥效果研究》研究了α-淀粉酶抑制剂的降糖、降脂和减肥作用。但是白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的热稳定性不高，如赵蓉的《白芸豆中减肥药物α-淀粉酶抑制剂的提纯及其性质研究》中指出α-淀粉酶抑制剂在85℃下加热10min或在90℃加热5min后就会失活，不利于工业化生产应用。

本发明通过比较清蛋白经不同蛋白酶酶解后的α-淀粉酶抑制活性及热稳定后发现，清蛋白经酸性蛋白酶适度水解后所得多肽溶液具有较高的α-淀粉酶抑制活性和热稳定性，但是随着酶解时间的延长其抑制活性会下降，因此要适度水解。通过比较不同糖和糖醇如麦芽糖、木糖醇、低聚异麦芽糖、海藻糖和异麦芽酮糖等加入白芸豆多肽中的热稳定性后，发现加入异麦芽酮糖的多肽对α-淀粉酶的抑制活性最高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种功能性白芸豆多肽及其制备方法，以及该功能性白芸豆多肽在制备减肥和降血脂保健食品中的应用。

本发明提供的一种功能性白芸豆多肽的制备方法，包括如下步骤：

(1)将芸豆粉按1︰10～20的比例与蒸馏水混合，用柠檬酸调节pH至4.5～5.5，在40～55℃水浴中浸提3～6h，然后离心收集上清液；

(2)上清液用截留分子量为10000Da的超滤膜超滤，滤出灰分、糖分等小分子物质，得到截留液；

(3)调节截留液pH至2.5～4.5，在截留液中按每克蛋白加入0.05-0.2g酸性蛋白酶酶解0.5-2h，水解后灭酶，离心取上清液，用6000Da的超滤膜超滤，收集截留液；

(4)将步骤(3)得到的截留液浓缩至含水分50％，得到白芸豆多肽浓缩液；按质量比70～86︰30～14加入多肽浓缩液和异麦芽酮糖，搅拌均匀，真空或喷雾干燥得到热稳定性较高的白芸豆功能多肽。

所述的酸性蛋白酶为537酸性蛋白酶或3.350酸性蛋白酶。

上述方法制得的白芸豆功能性多肽，具有对α-淀粉酶的抑制活性，可以在制备减肥和降血脂保健食品中应用。

与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果：

1.用柠檬酸调pH至4.5-5.5下提取，有利于保持清蛋白的热稳定性，同时减少杂蛋白的溶出。

2.因为白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的分子量在36000Da左右，因此用截留分子量为10000Da的超滤膜超滤，可以分离出小分子杂质，保留大分子清蛋白和α-淀粉酶抑制剂。

3.利用截留分子量为6000Da的超滤膜对白芸豆多肽进行超滤，收集截留液，可以获得经适度水解的清蛋白和α-淀粉酶抑制剂。研究过程中用3,5-二硝基水杨酸比色法测定不同分子量超滤膜截留多肽对α-淀粉酶的抑制活性，结果发现，分子量大于6000Da的多肽混合物具有较高的α-淀粉酶抑制活性和较高的热稳定性(见表1)，有利于常规加热或烹调加工。

4.清蛋白及加入异麦芽酮糖的清蛋白虽然对α-淀粉酶的抑制活性较高，但其热稳定性很低。而本发明的白芸豆多肽中加入一定比例的异麦芽酮糖后，可以在其对α-淀粉酶的抑制活性降低不多的同时，较大程度的提高该多肽的热稳定性(见表3)。

具体实施方式

实施例1