[发明专利]一种快速检测制药用水中微生物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物检测方法，具体涉及一种快速检测制药用水中微生物的方法。

背景技术

微生物快速检测方法是微生物学中的一个快速发展的方向，无论是对食品，药品用水安全的监督和管理，都需要一种较为快速的微生物检测方法。

目前，对于微生物菌含量的检测，主要是依照传统的方法，将待检测的对象，接种到适合的培养基中，进行培养，观察和计数。

但是目前的这种方法由于需要长期的培养，需要数天，这对于需及时检测到待检对象中的含菌量是不利的。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种快速检测制药用水中微生物的方法，以克服现有技术所存在的上述缺点和不足。本发明建立Milliflex Quantum方法快速检测制药用水中微生物的含量，可以更快地确认制药用水中否存在污染，避免产品的生产中断。更早得到微生物实验结果以对生产用水有更好的了解和掌握。该发明适用于微生物实验室，制药厂使用。

Milliflex Quantum基于荧光染色法的，设计用于可过滤产品的快速微生物计数检测的技术。这一简单易用的系统应用标准的工业薄膜过滤技术来培养单个样品中低至1CFU活的可培养的微生物。该方法是基于传统的薄膜过滤法，因此任何实验室都可以对此快速检测系统进行验证。

本发明是一种快速检测微生物的Miliflex Quantum试剂盒的使用方法，该方法将传统的微生物肉眼观察方法转化为使用荧光显微镜对荧光的检测。

本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：

一种快速检测制药用水中微生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)过滤待检测的制药用水，转移Milliflex膜至含培养基的平板上，根据微生物的种类培养42小时，66小时和5天；

(2)转移短期培养包括24，42，66小时的Milliflex膜至含有染色溶液的平板上；

(3)使用染色试剂盒所配置的染色液染色30min；

(4)用观察装置对发出荧光的微生物菌落进行计数，记为FC；

(5)转移Milliflex膜至含培养基的平板上再培养至5天，计数记为RIC，长期培养5天的Milliflex膜使用常规菌落计数，记为CC；

(6)考察不同时间点的荧光计数结果FC，减低剂量预处理RIC与传统膜过滤法计数结果CC比较，最终确定在42小时，各种微生物的FC值与CC值无显著性差异。

进一步，步骤(1)中，所述染色溶液采用Miliflex Quantum试剂盒，包括：复溶剂、荧光剂和染色缓冲液，首先将复溶剂与荧光剂混匀，然后再与染色缓冲液混匀制成。

进一步，步骤(2)中，所述染色溶液使用量为2ml/平板。

进一步，步骤(3)中，所述染色的温度为30-35℃。

本发明的有益效果：

1、本发明与传统的方法细菌培养相比较，该方法在42小时就可以将待检微生物检出，比较传统的5天培养法，较为快速，将污染的检出提前。

2、本发明Milliflex Quantum基于荧光染色法的，设计用于可过滤产品的快速微生物计数检测的技术，检测过程易于操作和观察。这一简单易用的系统应用标准的工业薄膜过滤技术来培养单个样品中低至1CFU活的可培养的微生物。该方法是基于传统的薄膜过滤法，因此任何实验室都可以对此快速检测系统进行验证。

3、本发明检测结果的准确性高。

附图说明

图1为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图2为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图3为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图4为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图5为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图6为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图7为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图8为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图9为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

图10为微生物的FC，RIC以及CC菌落计数图。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明作进步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。

实施例1Miliflex Quantum试剂盒的使用

Miliflex Quantum试剂盒包括：1复溶剂、2荧光剂、3染色缓冲液。