[发明专利]一种快速检测制药用水中微生物的方法无效
| 申请号： | 201410342511.1 | 申请日： | 2014-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN104099399A | 公开（公告）日： | 2014-10-15 |
| 发明（设计）人： | 马卫东;张锦文;吴国平 | 申请（专利权）人： | 上海罗氏制药有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201203 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 制药 水中 微生物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速检测制药用水中微生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)过滤待检测的制药用水，转移Milliflex膜至含培养基的平板上，根据微生物的种类培养42小时，66小时和5天；
(2)转移短期培养包括24，42，66小时的Milliflex膜至含有染色溶液的平板上；
(3)使用染色试剂盒所配置的染色液染色30min；
(4)用观察装置对发出荧光的微生物菌落进行计数，记为FC；
(5)转移Milliflex膜至含培养基的平板上再培养至5天，计数记为RIC，长期培养5天的Milliflex膜使用常规菌落计数，记为CC；
(6)考察不同时间点的荧光计数结果FC，减低剂量预处理RIC与传统膜过滤法计数结果CC比较，最终确定在42小时，各种微生物的FC值与CC值无显著性差异。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述染色溶液采用Miliflex Quantum试剂盒，包括：复溶剂、荧光剂和染色缓冲液，首先将复溶剂与荧光剂混匀，然后再与染色缓冲液混匀制成。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述染色溶液使用量为2ml/平板。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述染色的温度为30-35℃。
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