[发明专利]一种集样PCR检测HBV的试剂盒及应用

权利要求书

1.一种鉴定或辅助鉴定多个待测样本中哪些样本感染乙型肝炎病毒的试剂盒，包括单独使用的引物对A、单独使用的引物对B和记载PCR扩增方法的载体；

或包括含有所述引物对A的PCR试剂、含有所述引物对B的PCR试剂和所述记载PCR扩增方法的载体；

所述引物对A由序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成；

所述引物对B由序列表序列3所示的单链DNA和序列表序列4所示的单链DNA组成；

所述PCR扩增方法包括如下步骤：

1)将多个待测样本分为n组，且将每组中各待测样本等质量混合得到混合样本，每组待测样本数相同，提取每组所述混合样本的基因组DNA；

2)以每组所述混合样本的基因组DNA为模板，用所述引物对A进行第一次PCR扩增，得到第一次PCR扩增产物；

3)以所述第一次PCR扩增产物为模板，用所述引物对B进行第二次PCR扩增，得到每组待测样本的第二次PCR扩增产物；检测每组待测样本的第二次PCR扩增产物，选取PCR扩增产物具有大小为281bp片段的待测样本组；检测每组待测样本的第二次PCR扩增产物的方法为电泳检测；

4)将所述PCR扩增产物具有大小为281bp片段的待测样本组中的每个待测样本分别提取基因组DNA，分别重复步骤2)和3)，得到每个待测样本的第二次PCR扩增产物；

检测每个待测样本的第二次PCR扩增产物，若第二次PCR扩增产物具有大小为281bp片段，则该待测样本感染或候选感染HBV病毒；若第二次PCR扩增产物不具有大小为281bp片段，则该待测样本未感染或候选未感染HBV病毒。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述载体为说明书。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述含有所述引物对A的PCR试剂由PCR扩增缓冲液、所述引物对A和水组成；

所述含有所述引物对B的PCR试剂由PCR扩增缓冲液、所述引物对B和水组成。

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒，其特征在于：

所述引物对A和所述引物对B中的各条引物均为等摩尔混合；

所述引物对A和所述引物对B中的各条引物在其所在所述PCR试剂中的浓度均具体为0.4μM。

5.权利要求1-3中任一所述的试剂盒或由所述引物对A和所述引物对B组成的引物组或由所述含有所述引物对A的PCR试剂和所述含有所述引物对B的PCR试剂组成的PCR试剂组在制备鉴定或辅助鉴定多个待测样本中哪些样本感染乙型肝炎病毒的产品中的应用。