[发明专利]甾体烯酮类化合物蕨藻烯酮及其制备和用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说涉及一种从中国总状蕨藻中分离得到的具有特异支链的甾体类化合物。

背景技术

总状蕨藻 Caulerpa racemosa (Forssk?l) J. Agardh系绿藻门 (Chlorophyta) 绿藻纲 (Chlorophyceae) 管藻目(Siphonales) 蕨藻科 (Caulerpaceae) 蕨藻属（Caulerpa）海洋植物，主要分布于热带和亚热带海域，生长在潮间带以下的岩石、珊瑚礁上或者中、低潮带的沙地上。在我国海域也有广泛分布，主要集中于福建东山、台湾、海南、西沙、广东沿海。

糖尿病(diabetes mellitus) 是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症。目前，一般将糖尿病分为两类，I-型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病，insulin-dependent diabetes mellitus，IDDM) 与II-型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病，non-insulin-dependent diabetes mellitus，NIDDM)。糖尿病中90％以上是II-型糖尿病。

II-型糖尿病的特点是胰岛素敏感组织如骨骼肌、肝、脂肪组织对胰岛素作用的抵抗。蛋白酪氨酸磷酸酯酶(PTPases)在平衡细胞内胰岛素作用通路中相关蛋白酪氨酸磷酸化水平中的作用越来越受到重视，成为治疗II-型糖尿病的新途径。PTPase包括一大族跨膜(受体型)和胞内(非受体型)酶，参与调控一系列重要生命过程。目前，对PTPase在胰岛素通路中受体或受体后环节影响正常胰岛素作用的研究，主要集中在LAR-PTPase、SHPTP-2、PTP1B。

PTP1B是第一个被鉴定的蛋白酪氨酸磷酸酯酶( protein tyrosine phosphatase)，通过PTP1B 剔除的老鼠实验表明， PTP1B通过对胰岛素受体的脱磷酰化，进而在调节胰岛素敏感性和脂肪代谢过程中起着非常重要的作用。因而，选择性的、高活性的PTP1B抑制剂在II-型糖尿病、肥胖症及其并发症的治疗中有重要的价值。

发明内容

本发明是从中国总状蕨藻（C. racemesa）中提取分离得到的具有特异支链的甾体类化合物蕨藻烯酮（Caulerpenone）。经药理试验研究表明，该化合物对蛋白络氨酸磷酸酯酶1B（PTP1B)具有显著抑制活性。

因此，本发明的一个目的是提供新的甾体类化合物蕨藻烯酮。

本发明的另一个目的是提供所述蕨藻烯酮的制备方法。

本发明的进一步目的是提供所述蕨藻烯酮的用途。具体地说，所述蕨藻烯酮在制备蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B) 抑制剂的药物中的应用，进一步在制备治疗糖尿病、肥胖症及其并发症的药物中的应用。

根据本发明的第一个目的，本发明首次从总状蕨藻中发现了一个支链特异的甾体类化合物蕨藻烯酮，其化学结构如下所示：

。

根据本发明的第二个目的，本发明提供所述蕨藻烯酮的制备方法，它是从总状蕨藻中分离得到的，具体步骤如下：

1）制备提取物浸膏

将冷冻的总状蕨藻（C. racemosa）用乙醇按常规渗漉提取，得提取液，将提取液减压浓缩回收乙醇，得粗浸膏；

2）分离纯化

(1)将上述提取物分散于水中成混悬液，将混悬液依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，所得萃取液浓缩分别得到石油醚提取浸膏、乙酸乙酯提取浸膏和正丁醇提取浸膏；

(2) 将乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析，以石油醚/丙酮梯度洗脱，根据TLC显色合并相似流份得到5个组分（A-E）；其中组分B（石油醚/丙酮体积比85:15洗脱部分）经Sephadex LH-20凝胶柱层析，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1洗脱，再经硅胶柱层析，以石油醚/丙酮85:15体积比洗脱，最后经制备型HPLC，以甲醇/水90:10体积比洗脱，得到本发明化合物蕨藻烯酮。

在上述制备方法中，在制备提取物浸膏步骤中，所述提取采用的乙醇为95%乙醇。

在上述制备方法中，在分离步骤中，石油醚/丙酮梯度洗脱的浓度依次为体积比100:0、95:5、85:15、70:30和50:50。

在上述制备方法中，在分离步骤中，所述制备型HPLC的色谱柱的填料为RP-18。

根据本发明的第三个目的，本发明提供了所述蕨藻烯酮在制备PTP1B抑制剂、糖尿病药物、肥胖症药物的用途。