[发明专利]一种治疗类风湿性关节炎的微囊及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于基因治疗领域，涉及一种治疗类风湿性关节炎的微囊及其制备方法。

背景技术

类风湿性关节炎(Rheumatoidarthritis，RA)是以对称性多关节炎为主要临床表现的自身免疫性疾病，其病理主要表现为滑膜炎，即滑膜的增生、血管翳的形成以及免疫细胞浸润。可导致关节内软骨和骨的破坏，关节功能障碍，甚至残废。其病因及病理机制比较复杂，至今尚未完全明确。研究表明，IL-1在RA的发病机制中起着重要作用，是导致炎性反应的持续发生和软骨破坏的重要促炎性细胞因子。

IL-1Ra最早在上世纪80年代被发现，体内自然存在的IL-1Ra是具有22-26kDa的糖蛋白，其可以牢固的结合Ⅰ型IL-1受体，使IL-1完全丧失对其受体的激活功能而自己本身并不激活细胞。正常状态下IL-1与IL-1受体结合而引起的生理效应很大程度上受到IL-1Ra与IL-1受体结合状态的调控。在发生关节炎动物的滑膜组织内虽然可以产生IL-1Ra，但是由于其数量有限，不能完全抵消IL-1的作用，因此单纯依靠体内天然产生的IL-1Ra不足以抑制疾病的发展。在胶原诱导关节炎大鼠模型的研究也发现随着疾病的发展滑膜中IL-1/IL-1Ra比例也会持续升高，而且其与关节炎指数的升高呈正相关。IL-1Ra基因敲除小鼠会发生严重关节炎也进一步表明了IL-1/IL-1Ra平衡在维持体内关节正常生理过程及免疫系统内环境稳定中的重要意义。基于体内IL-1/IL-1Ra的动态平衡，通过导入外源性IL-1Ra恢复在类风湿关节炎发病中遭到破坏的相互制约关系已经成为该病治疗中的重要指导思想之一。

目前应用IL-1Ra治疗类风湿关节炎在动物模型和病人体内都取得了很好的疗效。有文献研究表明，在免疫复合物诱导小鼠关节炎模型和兔抗原诱导关节炎模型中应用IL-1Ra可以明显抑制炎症的发展，减轻骨和软骨的破坏。同时也发现过度表达IL-1Ra的转基因鼠很少发生胶原诱导性关节炎。对类风湿关节炎患者静脉注射IL-1Ra不但可以抑制白细胞向滑膜部位浸润及关节软骨蛋白多糖合成减少而且还可以降低破骨细胞活化及金属基质蛋白酶的释放，从而对骨和软骨起到保护作用。

已经有对应IL-1Ra的商品药物应用临床，anakerin是最重要的制剂之一。动物实验结果显示，anakerin可以抑制胶原诱导关节炎小鼠对Ⅱ型胶原的抗体反应，保护骨和关节免受进一步破坏。长期多中心临床应用疗效评估结果表明，应用皮下注射anakerin可以明显延缓类风湿关节炎患者受累关节的破坏速度和程度，减轻疼痛，相应的VAS评分指数明显降低。但是由于皮下注射药物伴有较多的副作用，主要是皮注射部位反应，以至于有一部分患者放弃这一疗法，通过其他途径应用IL-1Ra治疗类风湿关节炎的研究也在进行当中。

随着基因重组技术的迅速发展，人们开始尝试基因治疗，即利用重组细胞的代谢产物调节机体生理功能，治疗相关疾病。目前导入基因治疗疾病的技术也日渐成熟，已经可以通过各种转染方式将编码IL-1Ra基因的质粒或腺病毒导入到类风湿关节炎动物模型体内使IL-1Ra蛋白持续表达并取得了较好的疗效，其中以病毒载体效率最高。但是由于病毒为载体的基因治疗应用可以激发机体的针对病毒载体的免疫反应。因此如何减少病毒载体的免疫反应成为基因治疗的一个研究热点。

抗IL-1药物在临床上治疗RA有明显的效果，然而这种治疗不良反应大，较昂贵需反复注射，因此受到了限制。基因治疗将具有治疗作用的基因重组到真核表达载体，转移至人体细胞，表达出具有治疗作用的多肽或蛋白质，从而达到治疗目的。IL-1Ra可减轻和阻断RA的进展。移植携带IL-1Ra基因的细胞可抑制疾病进展。转基因细胞移植可诱发免疫反应且不利细胞生存。