[发明专利]一种治疗类风湿性关节炎的微囊及其制备方法无效
| 申请号： | 201410334116.9 | 申请日： | 2014-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN104127884A | 公开（公告）日： | 2014-11-05 |
| 发明（设计）人： | 张超;岳倩宇;刘伟;杨召;赵毅;姚绍平;胡建华;李宏键 | 申请（专利权）人： | 云南省第一人民医院 |
| 主分类号： | A61K48/00 | 分类号： | A61K48/00;A61K35/28;A61K47/36;A61K9/50;A61P29/00;A61P19/02 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 650100 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 治疗 类风湿性关节炎 及其 制备 方法 | ||
1.一种治疗类风湿性关节炎的微囊，其特征在于：为包裹转IL-1Ra基因的骨髓间充质干细胞的海藻酸-聚赖氨酸-海藻酸微囊。
2.根据权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎的微囊，其特征在于：直径为200μm。
3.根据权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎的微囊，其特征在于：所述的骨髓间充质干细胞来源于大鼠。
4.根据权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎的微囊，其特征在于：所述的转IL-1Ra基因的骨髓间充质干细胞为将逆转录病毒载体PLXRN-IL-1Ra转染到骨髓间充质干细胞得到。
5.权利要求1所述的治疗类风湿性关节炎的微囊的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)利用PT67细胞株包装重组PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒；
(2)从大鼠骨髓分离培养间充质干细胞；
(3)重组PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒转染骨髓间充质干细胞；
(4)利用高压静电法制作包裹PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒转染骨髓间充质干细胞的微囊。
6.根据权利要求5所述的治疗类风湿性关节炎的微囊的制备方法，其特征在于步骤(4)为：
1)将转染PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒的骨髓间充质干细胞与海藻酸钠混合制成细胞悬液，细胞终浓度为3×106/mL，海藻酸钠浓度终为1.75％的溶液；溶剂为0.9％NaCl；
2)于电压为3kV，液面距25mm，推进速度30mm/h的高压静电场成囊装置中，将该混合液滴入100mmol/L CaCl2溶液中并反应10min，用0.9％NaCl洗涤两次；
(3)再与0.05％聚赖氨酸溶液反应使微粒外包裹一层聚赖氨酸并反应5min，0.9％NaCl洗涤两次；
(4)加入0.15％海藻酸钠溶液中和微粒表面电荷，0.9％NaCl洗涤两次；
(5)最后用55mmol/L柠檬酸钠溶液置换出微粒核心中的钙离子得到微囊，0.9％NaCl洗涤两次。
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