[发明专利]一种筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法无效
| 申请号： | 201410326335.2 | 申请日： | 2014-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN104087669A | 公开（公告）日： | 2014-10-08 |
| 发明（设计）人： | 向双林;魏科;颜峰;胡翔;张健 | 申请（专利权）人： | 湖南师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 长沙永星专利商标事务所 43001 | 代理人： | 周咏;林毓俊 |
| 地址： | 410081 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 鉴定 mirnas 调控 基因 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法，其特征在于包括：
（1）将miRNAs与靶基因组DNA互补结合的RNA链进行生物素标记，转染细胞后，利用甲醛将miRNAs和与之结合的DNA、蛋白交联在一起；
（2）将生物素标记的miRNAs以及结合在一起的DNA进行Streptavidin-Biotin亲和沉淀分离和纯化；
（3）通过克隆和测序鉴定分离纯化出来的DNA序列，鉴定出miRNAs调控的靶基因。
2.根据权利要求1所述的筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法，其特征在于所述miRNAs为miRNA-373。
3.根据权利要求2所述的筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法，其特征在于将miRNA-373的反义链3’末端进行生物素标记。
4.根据权利要求1或2所述的筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法，其特征在于转染MCF-7细胞。
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