[发明专利]一种用液相色谱法分析帕潘立酮中间体及有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种液相色谱法分离分析帕潘立酮中间体及其有关物质的方法。 

背景技术

帕潘立酮在临床上用于精神分裂症的治疗。帕潘立酮中间体英文化学名为4-（6-fluoro-3a,7a-dihydrobenzo[d]isoxazol-3-yl）-1-(2-(9-hydroxy-2-methyl-4-oxo-3,4,6,7,8,9-hexahydro-2H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-3-yl)ethyl)piperidine 1-oxide，分子式为C₂₃H₂₇FN₄O₄。帕潘立酮中间体结构式为： 

                                                    

在帕潘立酮的生产过程中，中间体有关物质去除不完全，将会引起副反应的发生，增加副产品的含量，从而严重影响药物的产率、纯度和质量，对于帕潘立酮中间体的合成主要控制的有关物质有3个，分别是有关物质1 ：3-（2-Chloro-ethyl）-9-hydroxy-2-methyl-6,7,8,9-tetrahydro-pyrido[1,2-α]pyrimidin-4-one、有关物质2 ：3-{2-[4-(6-Fluoro-benzo[α]isoxazol-3-yl)-piperidin-1-yl]-ethyl}-9-hydroxy-2-methyl-6,7,8,9-tetrahydro-pyrido[1,2-α]pyrimidin-4-one、有关物质3： 6-fluoro-3-(piperidin-4-yl)benzo[d]isoxazolechloride，结构式分别为：

      

有关物质-1                                             有关物质-3

有关物质-2   

在帕潘立酮工艺生产过程中由中间体引入的杂质，将会严重影响药物的产率和质量，且在原料药中需要进行质量控制，增加原料药质量控制的难度，因此，实现帕潘立酮中间体及其有关物质的分离与分析，在帕潘立酮的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析帕潘立酮中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现帕潘立酮中间体与其有关物质的分离和测定，保证帕潘立酮及含帕潘立酮制剂的质量。 

本发明所述的用液相色谱法分析帕潘立酮中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，是采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的无机盐缓冲溶液-有机相为流动相。 

本发明所述的色谱柱选自品牌为Kromasil 和ES的Rp-C18色谱柱，优选Kromasil-C₁₈。 

本发明所述的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选甲醇。 

本发明所述的流动相缓冲盐溶液-有机相采用浓度梯度洗脱。 

本发明所述的缓冲盐溶液中的缓冲盐选自磷酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐，优选为磷酸盐，最优选为磷酸二氢钾。 

本发明所述的缓冲盐溶液中包含的缓冲盐浓度为0.01～0.1mol/L，优选浓度为0.02mol/L。 

本发明所述的缓冲溶液最优pH值为3.0。 

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现： 

1) 取帕潘立酮中间体样品适量，用甲醇或流动相溶解样品，配制成每1mL含帕潘立酮中间体及其有关物质0.1～1.5mg，优选为0.5mg/mL的样品溶液；

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min ，优选为1.0mL/min，检测波长为205～280nm，优选为225nm，柱温箱温度为20～50℃，优选为25℃；

3) 取1)的样品溶液10～50μL，优选为10μL，注入液相色谱仪，完成帕潘立酮中间体及其有关物质的分离与分析。

本发明使用的仪器与最优色谱条件： 

高效液相色谱仪：岛津：LC-20AT， CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp； 

色谱柱：C₁₈（Kromasil，250×4.6 mm，5μm）；